原核表達,為什麼空載表達的很好,目的蛋白沒有表達,可能的原因

2021-04-20 16:50:35 字數 1148 閱讀 7391

1樓:匿名使用者

目的蛋白的表達跟基因本身關係密切,載體,表達條件關係也很大。空載體能表達不代表你的蛋白能在該條件下表達。

2樓:

目的蛋白的訊號肽是否被宿主識別?

原核表達第一次大量表達了目的蛋白但第二次表達出的目的蛋白就很少了為什麼

3樓:小楚

目的蛋白的表達跟基因本身關係密切,載體,表達條件關係也很大。空載體能表達不代表你的蛋白能在該條件下表達。

求助:原核表達目的蛋白胞內發生降解

4樓:匿名使用者

應該是原核表達宿主菌比較準確 原核表達宿主菌之前可以表達蛋白,放一段時間不表達蛋白原因很多 首先要確認其他條件是否也有改變,比如其他基因,質粒載體,表達條件等等 原核表達宿主菌儲存條件沒有控制好可能導致宿主菌退化,被汙染等等,結果。能抑制多長時間你需要自己檢測。不同細胞、不同sirna、不同轉染試劑都會影響效率。

但是假設你轉染之後48小時或者72小時之後passage 細胞做mtt或者轉殖形成實驗,個人覺得是可以的(前提是你有48小時或72小時knockdown證據)。

原核表達蛋白降解問題 20

5樓:匿名使用者

iptg induction and his-tag protein purification?

問學長姊比較快

蛋白表達純化實驗中,如原核表達純化,蛋白總是包涵體該怎麼辦?請大神幫忙解答啊,,

6樓:血薇夕影之歌

原核蛋白表達純bai化是du很容易形成包涵體的zhi,在現階段可dao以採用倆種版手段,一是預防,二是復權性。

先說「預防」,預防就是指在蛋白過表達形成包涵體前,對表達環境進行優化的一些手段,來降低重組蛋白合成的速率。例如:密碼子優化,表達溫度的選擇,與分子伴侶或摺疊酶共表達等等;而蛋白質的復性則是指:

在變性條件不劇烈,變性蛋白質內部結構變化不大時,除去變性因素,在適當條件下變性蛋白質可恢復其天然構象和生物活性的方法。

這倆種方法說起來都比較麻煩,涉及的知識點和概念比較多,建議先看一些資料比較好。

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