1樓：百浩生物
如果293t本身不表達這個蛋白的話，最大的可能是一抗質量不過關
你可以做一下免疫印跡看看。免疫組化假陽性多正常（非特異性吸附）。
免疫印跡western blotting用分子量大小來判斷，很難出假的。
2樓：伊良部一郎
是目的基因的抗體做的麼？
是不是293t本身表達這個蛋白？
3樓：匿名使用者
贏潤生物技術支援 孫永林 加qq12695920
4樓：匿名使用者
題目不完整，無法作答
真核表達載體pcdna3.1可以加上his標籤嗎
5樓：黑傘下的光明
如果293t本身不表達這個蛋白的話，最大的可能是一抗質量不過關
你可以做一下免疫印跡看看。免疫組化假陽性多正常（非特異性吸附）。
免疫印跡western blotting用分子量大小來判斷，很難出假的。
pcdna3.1重組質粒用脂質體轉染原代培養細胞能穩定表達嗎
293t細胞為什麼經常用於轉染、蛋白質表達？
原核表達載體和真核表達載體的區別
6樓：威海博銳化機
一、表達載體不同：
原核表達載體構建重組表達載體：
1、載體酶切：將表達質粒用限制性內切酶（同引物的酶切位點）進行雙酶切，酶切產物行瓊脂糖電泳後，用膠**kit或凍融法**載體大片段。
2、pcr產物雙酶切後**，在t4dna連線酶作用下連線入載體。
真核細胞表達載體之一為pegfp-n1載體，具有對方面的優點。pegfp-n1載體上攜帶有egfp蛋白表達基因。
二、表達實現方式不同：
真核表達載體具有neo基因，可以採用g418來篩選已成功轉染了該載體的靶細胞。這些特殊的結構可以實現目的基因在靶細胞內的穩定表達。
三、獲得目的基因方式不同：
pegfp-n1載體從結構上看，質粒具有很強的複製能力，可以滿足隨宿主細胞**時跟隨胞質遺傳給新生的子細胞，這是真核細胞表達載體保證目的基因穩定表達的因素之一。
原核表達載體獲得目的基因：
1、通過pcr方法：以含目的基因的轉殖質粒為模板，按基因序列設計一對引物（在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點），pcr迴圈獲得所需基因片段。
2、通過rt-pcr方法：提取總rna，以mrna為模板，逆轉錄形成cdna第一鏈，以逆轉錄產物為模板進行pcr迴圈獲得產物。
7樓：匿名使用者
原核載體可以將真核基因表達，但是表達出來的蛋白是沒有活性的，因為缺少翻譯後修飾系統。。。真核的表達載體呢 由於比較大 不適合大量快速擴增，所以要在其載體上構建可以在原核生物 如大腸桿菌中複製的所需的複製原件 。。。。綜上 在應用的時候 要構建 穿梭質粒 可以穿梭於 原核和 真核 呵呵 還有就是 原核表達載體的基本元件和真核的有不同的地方 。。。。。
總覺得不夠正確答案 。。。。。有些人緣的蛋白在原核裡沒有蛋白翻譯後修飾，表達後沒有活性，這時候就得在真核裡表......
8樓：匿名使用者
主要是因為原核和真核表達系統所需的表達元件不同。
比如說啟動子，終止子在兩種表達系統中是不一樣的。
帶有真核表達元件的是真核載體，能在真核生物內表達；
帶有原核表達元件的是原核載體，能在原核生物內表達。
兩者都具有的為穿梭載體。
1)真核表達載體和原核表達載體就是能在真核生物或原核生物中表達的載體,它們一般都帶有能在真核生物或原核生物中表達的必需表達元件;
2)真核表達和原核表達的目的都是為了能夠大量獲得自己所需要的目的基因的表達產物,最好有生物活性,以便下一步的實驗需要.
3)原核表達載體一般只能在原核生物中表達外源基因,但有些穿梭載體可以分別在真核和原核生物中表達它們的表達元件.
基因疫苗的載體pcdna3.1有何好處
真核表達質粒pcdna3.1有哪些性質和特點？
9樓：匿名使用者
有用於表達外源基因的cmv啟動子，用於篩選的青黴素抗性基因，用於外源基因轉殖的多轉殖酶切位點mcs,提供轉錄終止訊號的bgh
10樓：乙醯苯胺
不知這上面有沒有能幫到你的資料。
我才疏學淺，現在還徘徊在原核生物質粒dna的研究中……
質粒轉染後蛋白表達量低，如何提高？ 5
11樓：匿名使用者
質粒沒有儲存好？ 既然之前能高 那就還是重新提一下吧
基因表達載體的構建方法有幾種,基因表達載體的構建方法是一致的
你好，具體的看看這個吧 希望有所幫助 現在很多生物公司可以提供載體構建服務的，例如中美泰和生物技術公司 基因表達載體的構建方法是一致的 基因表達載體的構建 是將目的基因與運載體結合的過程 重組基因表達載體構建途徑有哪些 事實上,載體上的各個部件類似工程中的各個功能模組,可以從分子生物學知識中得出.例...
為什麼構建的真核表達載體在真核細胞中不表達
有的時候在不同的表達體系裡面對蛋白的表達量是有影響的。當構建完成後攜帶有訊號肽的時候，一些蛋白在真核表達體系中表達量極低。去除訊號肽序列值後，直接表達成熟肽，表達水平明顯提高。所以說構建的真核表達載體高表達mrna卻檢測不到目的蛋白是完全有可能的。是在真核生物細胞中的基因表達載體的元件麼？如果是，元...
為什麼基因表達載體的構建是基因工程的核心
因為目的基因要靠運載體進入受體細胞，然後目的基因才能在受體細胞中表達。所以基因表達載體的構建是基因工程的核心 下列關於基因表達載體的構建描述錯誤的是 a 基因表達載體的構建是基因工程的核心b 基因表達載體 a 基因表達載體使目的基因在受體細胞中穩定存在並且可以遺傳給下一代並表達和發揮作用，是基因工程...