1樓：匿名使用者
液相色譜儀的原理：
儲液器中的流動相被高壓幫浦打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內，由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配係數，在兩相中作相對運動時，經過反覆多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電訊號傳送到記錄儀，資料以圖譜形式列印出來。
主要用於對高沸點、難氣化合物的混合物通過色譜柱核淋洗劑並以實現分離。應用於生物化學、生物醫學、環境化學、石油化工等部門。
液相色譜儀根據固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜(llc）及液-固色譜(lsc）。現代液相色譜儀由高壓輸液幫浦、進樣系統、溫度控制系統、色譜柱、檢測器、訊號記錄系統等部分組成。與經典液相柱色譜裝置比較，具有高效、快速、靈敏等特點。
高效液相色譜儀主要有進樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和資料處理系統。
進樣系統
一般採用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作，進樣量是恆定的。這對提高分析樣品的重複性是有益的。
輸液系統
該系統包括高壓幫浦、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓幫浦的一般壓強為l．47～4．4x10pa，流速可調且穩定，當高壓流動相通過層析柱時，可降低樣品在柱中的擴散效應，可加快其在柱中的移動速度，這對提高解析度、**樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。
分離系統
該系統包括色譜柱、連線管和恆溫器等。色譜柱一般長度為10～50cm（需要兩根連用時，可在二者之間加一連接管），內徑為2～5mm，由"優質不鏽鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料製成，住內裝有直徑為5～10μm粒度的固定相（由基質和固定液構成）。
固定相中的基質是由機械強度高的樹脂或矽膠構成，它們都有惰性（如矽膠表面的矽酸基因基本已除去）、多孔性（孔徑可達1000?）和比表面積大的特點，加之其表面經過機械塗漬（與氣相色譜中固定相的製備一樣），或者用化學法偶聯各種基因（如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等）或配體的有機化合物。
2樓：我弄丟乙個人
液相色譜儀系統是由由儲液器、幫浦、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。
液相色譜儀的原理：儲液器中的流動相被高壓幫浦打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內，由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配係數，在兩相中作相對運動時，經過反覆多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電訊號傳送到記錄儀，資料就可以以圖譜形式列印出來，以便研究人員分析。
液相色譜儀的用途：
在聚合物的分析中，吸附色譜一般用來分離新增劑，如偶氮染料、抗氧化劑、表面活性劑等，也可用於石油烴類的組成分析。
用於氨基酸、蛋白質的分析，也適合於某些無機離子(no3-、so42-、cl-等無機陰離子和na+、ca2+、mg2+、k+等無機陽離子)的分離和分析，具有十分重要的作用。
適用於水溶液的體系，又適用於有機溶劑的體系。當所用的洗脫劑為水溶液時，稱為凝膠過濾色譜，其在生物界的應用比較多。
拓展回答：
液相色譜儀的應用：高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液，不受樣品揮發性的限制，流動相可選擇的範圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量範圍的物質。與試樣預處理技術相配合，hplc所達到的高解析度和高靈敏度，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能，能夠分離複雜相體中的微量成分。
隨著固定相的發展，有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離hplc成為解決生化分析問題最有前途的方法。由於hplc具有高解析度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反覆利用，流出組分易收集等優點，因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。
3樓：匿名使用者
液相色譜儀的原理：
液相色譜儀由高壓輸液幫浦、進樣系統、溫度控制系統等組成，是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對混合物進行先分離，而後分析鑑定的儀器。儲液器中的流動相被高壓幫浦打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內，由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配係數，在兩相中作相對運動時，經過反覆多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電訊號傳送到記錄儀，資料以圖譜形式列印出來。
應用：高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液，不受樣品揮發性的限制，流動相可選擇的範圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量範圍的物質。與試樣預處理技術相配合，hplc所達到的高解析度和高靈敏度，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能，能夠分離複雜相體中的微量成分。
隨著固定相的發展，有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離hplc成為解決生化分析問題最有前途的方法。由於hplc具有高解析度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反覆利用，流出組分易收集等優點，因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是乙個重要的發展方向。
液相色譜-質譜連用技術受到普遍重視，如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等；液相色譜-紅外光譜連用也發展很快如在環境汙染分析測定水中的烴類，海水中的不揮發烴類，使環境汙染分析得到新的發展。
系統組成及特點：
1、進樣系統
一般採用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作，進樣量是恆定的。這對提高分析樣品的重複性是有益的。
2、輸液系統
該系統包括高壓幫浦、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓幫浦的一般壓強為l．47～4．4x10pa，流速可調且穩定，當高壓流動相通過層析柱時，可降低樣品在柱中的擴散效應，可加快其在柱中的移動速度，這對提高解析度、**樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動相貯存器和梯度儀，可使流動相隨固定相和樣品的性質而改變，包括改變洗脫液的極性、離子強度、ph值，或改用競爭性抑制劑或變性劑等。
這就可使各種物質（即使僅有乙個基團的差別或是同分異構體）都能獲得有效分離。
3、分離系統
該系統包括色譜柱、連線管和恆溫器等。色譜柱一般長度為10～50cm（需要兩根連用時，可在二者之間加一連接管），內徑為2～5mm，由"優質不鏽鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料製成，住內裝有直徑為5～10μm粒度的固定相（由基質和固定液構成）．固定相中的基質是由機械強度高的樹脂或矽膠構成，它們都有惰性（如矽膠表面的矽酸基因基本已除去）、多孔性（孔徑可達1000）和比表面積大的特點，加之其表面經過機械塗漬（與氣相色譜中固定相的製備一樣），或者用化學法偶聯各種基因（如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等）或配體的有機化合物。因此，這類固定相對結構不同的物質有良好的選擇性。
例如，在多孔性矽膠表面偶聯豌豆凝集素（psa）後，就可以把成纖維細胞中的一種醣蛋白分離出來。
另外，固定相基質粒小，柱床極易達到均勻、緻密狀態，極易降低渦流擴散效應。基質粒度小，微孔淺，樣品在微孔區內傳質短。這些對縮小譜帶寬度、提高解析度是有益的。
根據柱效理論分析，基質粒度小，塔板理論數n就越大。這也進一步證明基質粒度小，會提高解析度的道理。
再者，高效液相色譜的恆溫器可使溫度從室溫調到60c，通過改善傳質速度，縮短分析時間，就可增加層析柱的效率。
4樓：退休之前
儲液器中的流動相被高壓幫浦打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配係數,在兩相中作相對運動時,經過反覆多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電訊號傳送到記錄儀,資料以圖譜形式列印出來。
5樓：沙發上看大廈
高效液相色
譜法（high performance liquid chromatography \ hplc）又稱「高壓液相色譜」、「高速液相色譜」、「高分離度液相色譜」、「近代柱色譜」等。高效液相色譜是色譜法的乙個重要分支，以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相幫浦入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。該方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術。
高效液相色譜法按分離機制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法（正相與反相）、離子交換色譜法、離子對色譜法及分子排阻色譜法。
1．液固色譜法 使用固體吸附劑，被分離組分在色譜柱上分離原理是根據固定相對組分吸附力大小不同而分離。分離過程是乙個吸附－解吸附的平衡過程。常用的吸附劑為矽膠或氧化鋁，粒度5~10μm。
適用於分離分子量200~1000的組分，大多數用於非離子型化合物，離子型化合物易產生拖尾。常用於分離同分異構體。
2．液液色譜法 使用將特定的液態物質塗於擔體表面，或化學鍵合於擔體表面而形成的固定相，分離原理是根據被分離的組分在流動相和固定相中溶解度不同而分離。分離過程是乙個分配平衡過程。
塗佈式固定相應具有良好的惰性；流動相必須預先用固定相飽和，以減少固定相從擔體表面流失；溫度的變化和不同批號流動相的區別常引起柱子的變化；另外在流動相中存在的固定相也使樣品的分離和收集複雜化。由於塗佈式固定相很難避免固定液流失，現在已很少採用。現在多採用的是化學鍵合固定相，如c18、c8、氨基柱、氰基柱和苯基柱。
液液色譜法按固定相和流動相的極性不同可分為正相色譜法(npc)和反相色譜法(rpc)。
正相色譜法：採用極性固定相（如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相）；流動相為相對非極性的疏水性溶劑（烷烴類如正已烷、環已烷），常加入乙醇、異丙醇、四氫呋喃、三氯甲烷等以調節組分的保留時間。常用於分離中等極性和極性較強的化合物（如酚類、胺類、羰基類及氨基酸類等）。
反相色譜法：一般用非極性固定相（如c18、c8）；流動相為水或緩衝液，常加入甲醇、乙腈、異丙醇、丙酮、四氫呋喃等與水互溶的有機溶劑以調節保留時間。適用於分離非極性和極性較弱的化合物。
rpc在現代液相色譜中應用最為廣泛，據統計，它佔整個hplc應用的80%左右的時間。適用於分離非極性和極性較弱的化合物。rpc在現代液相色譜中應用最為廣泛，據統計，它佔整個hplc應用的80%左右。
高效液相色譜儀標準曲線怎麼做
做標準曲線首先有標準物質，然後有乙個曲線的濃度範圍。比如說，標準物質x，濃度是0.1mg ml 2mg ml。配製樣品的時候，取x適量，配製成濃度為10mg ml的母液，然後逐級稀釋，配製成濃度為0.1mg ml，0.2mg m，0.5mg ml，1.0mg ml，2.0mg ml的樣品，然後按照濃...
高效液相色譜儀的分離度為什麼要大於
相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值.也叫解析度,表示相鄰兩峰的分離程度.r越大,表明相鄰兩組分分離越好.1 一般說當r 1時,兩峰有部分重疊 當r 1.0時,分離度可達98 2 當r 1.5時,稱為6 分離,裸露峰面積為99.7 r 1.5稱為完全分離.中國藥典 規定r應大於1.5.通常用r 1...
色譜儀怎麼使用，色譜儀怎麼使用
色譜儀操作步驟如下 a 開啟氣體發生器 b 觀察空氣 氫氣 氮氣三個壓力錶的指標是否達到規定位置 空氣在0.15mpa左右 氫氣在0.1mpa左右 氮氣在0.3mpa左右 c 三個壓力錶均達到規定數值後，開啟色譜儀的電源開關，調節進樣口溫度 柱溫 檢測器溫度。d 待溫度達到設定溫度時，將氫氣按鈕轉到...