質粒轉染和病毒轉染有什麼本質上的區別

2021-03-27 19:20:52 字數 2464 閱讀 4615

1樓:阿樓愛吃肉

兩者在本質上並沒有區別。

無論是質粒轉染,還是病

毒轉染,均是真核細胞主動或被動匯入外源dn**段而獲得新的表型的過程。隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發展,轉染已經成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質生產等生物學試驗中,其應用越來越廣泛。

隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬於通過物理方法將基因匯入細胞的範例;

化學介導方法很多,如經典的磷酸鈣共沉澱法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術;生物介導方法,有較為原始的原生質體轉染,和現在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。

2樓:匿名使用者

一、質粒轉染:相對簡單的基因傳遞方式,與三種病毒載體主動進行細胞攻擊侵染方式不

同,質粒轉染屬於被動擴散。

質粒轉染的優點:質粒載體的構建流程相對簡單,速度快(病毒載體都需要先構建載體後包裝成病毒顆粒)。

質粒轉染的缺點也十分明顯:

1)在細胞水平,質粒轉染效率不穩定,不同細胞依照不同的轉染方法和轉染介質,效率差

別較大,且大部分方法效率不高;

2)質粒轉染一般入核效率低,特別是陽離子脂質體,陽離子聚合物等介質,電轉質粒入核

的效率則比介質轉高不少,但比起慢病毒轉染,效率仍然低很多,且對細胞損傷較大。

二、病毒載體轉染:病毒載體相對於質粒,優勢十分明顯

病毒載體的優點:轉染效率高,應用不同的病毒載體工具可實現細胞和動物的高效轉導

和穩定轉導。

病毒載體的缺點:不同的病毒載體的包裝需要比較複雜流程和工藝優化,相對技術門檻

較高。我們實驗室的經費比較有限,我們用rfect-dna轉染293細胞

3樓:

先說下相同點。

質粒轉染和病毒轉染本質上都

是把外源基因匯入細胞或活體,起到的作用是把外源基因放入細胞,是相同的。

區別,簡單的可以從英文角度說一下,質粒轉染中的轉染這個詞是transfection,病毒轉染中的轉染可以是transduction。可以理解為把質粒(目的基因)transfection 到病毒的域,病毒接收到目的基因,使用病毒又把我們的質粒(目的基因)transduction 進細胞。

如果你是學生問這個問題可能問的是兩者用起來有什麼區別。

質粒轉染需要用轉染試劑或者工具進行質粒的匯入。

病毒轉染中病毒粒子是病毒殼(介導細胞轉導/引入整合酶/介導體內靶向轉導)+目的基因的複合物,不用或者用簡單的試劑就能完成基因匯入。

詳細的就不說了,內容太多,這個問題太廣。

4樓:匿名使用者

平時都是用無菌的質粒dna轉染,質粒轉染不一定需要慢病毒包裝,lipo3000是屬於質粒dna和sirna都能轉染的,我們實驗室用專門轉染質粒dna的deofecteu。

真核質粒轉染與脂質體轉染有什麼不同?

5樓:匿名使用者

轉入質bai粒的原理:質粒上連的片段轉du錄後能夠自身互補zhi形成雙鏈(daoshrna),在細胞內版被細胞自己剪下權成sirna。

兩種轉染方法在功能上是一致的。但是sirna轉染以後發揮作用的時間較短,用於短期抑制試驗(一般維持一週以內)。而因為質粒存在於細胞內比較穩定(載體上含有抗生素標記,可以篩選),能夠持續表達產生shrna,然後不斷產生新的sirna,因此維持作用的時間長(可以超過兩周)。

另外用質粒還可以同時轉入報告基因作為對照,確定質粒確實已經轉染進去了。

求基因沉默和質粒轉染詳細區別? 包括兩者原理、實驗步驟區別聯絡。。 有滿意回答者另有100財富獎勵!!

6樓:伊良部一郎

簡略回答 不懂追問:

1. 基因沉默一般用sirna或者質粒 ,sirna是雙鏈rna,其中一條鏈與靶基因的mrna序列互補。將此雙鏈rna轉染至細胞 能夠沉默靶基因的表達

shrna質粒 轉染進細胞能夠表達shrna(發卡結構) 和雙鏈rna差不多 只不過是發卡結構。發卡的一條臂與靶基因mrna互補。 shrna質粒可以做穩定轉染 達到持續干擾的效果 人工合成的sirna不能穩定轉染

2. 轉染。 就是通過轉染試劑 將外源核酸(比如sirna 質粒等)匯入細胞的過程

細胞究竟是應該同時轉染兩種質粒呢還是只需乙個質粒上

7樓:匿名使用者

一般是以回克數來規範轉

答染的質粒數量,所以會有很多質粒.一般轉染的質粒除了帶有需要過表達的基因以外,還需要帶有標記基因.標記基因可以被特定的抗體檢測,從而判斷是否有效表達.

如果你要過表達的是某種蛋白,也可以直接通過該蛋白的抗體檢測,對照是沒有轉染的同種細胞,這樣表達效果就可以通過western blot看見了.過表達倒沒什麼標準,每種蛋白表達量也不一致,選擇適合自己的濃度就好.

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