如何利用gus報告基因檢測所需基因

2021-03-04 06:25:28 字數 1019 閱讀 2421

1樓:匿名使用者

標記基因通常用來檢驗重組dna載體轉化成功與否,或者檢測目的基因在植物細胞或組織中的定位。常用的標記基因是一些抗生素抗性基因,如卡那黴素抗性基因、潮黴素標記基因等。

如:某種具有氨苄抗性基因質粒(該基因即可認為標記基因),與外源dn**段組合形成重組質粒,並被轉入受體細胞後,就可以根據受體細胞是否具有氨苄抗性來判斷受體細胞是否獲得了目的基因。當用選擇培養基(比如含有氨苄的培養基),來培養受體細胞時,能夠在培養基中存活下來的受體細胞就可以認為是成功的匯入了外源dna,標記基因就起作用了。

作為報告基因,在遺傳選擇和篩選檢測方面必須具有以下幾個條件:(1)已被轉殖和全序列已測定;(2)表達產物在受體細胞中不存在,即無背景,在被轉染的細胞中無相似的內源性表達產物;(3)其表達產物能進行定量測定。目前常用的報告基因有氯黴素乙醯轉移酶基因(cat)、螢光素酶基因(luc)、β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)、分泌型鹼性磷酸酶基因(seap)、綠色螢光蛋白基因(gfp)等。

如:綠色螢光蛋白(gfp)基因。綠色螢光蛋白**於海洋生物水母,其基因可在異源組織中表達並產生光,gfp

cdnad開放閱讀框架長度約740bp,編碼238個氨基酸殘基,其肽鏈內部第65-67位絲氨酸-脫氫酪氨酸-甘氨酸通過自身環化和氧化形成乙個髮色基因,在長紫外波長或藍光照射下發出綠色螢光。轉染後的細胞可在螢光顯微鏡或流式細胞儀(facs)中直接觀察基因的表達。

gus reporter gene 是什麼意思,作用是什麼

2樓:匿名使用者

gus reporter gene 是 gus 報告

基因的意思

gus (b-glucuronidase)基因作為一種報告基因,在植物遺傳轉化研究中有廣泛的用途。gus基因來自於大腸桿菌,編碼b-葡聚糖苷酶(一種水解酶),可催化底物5-溴-4-氯-3-吲哚葡聚醣醛酸苷(5-bromo-4-chloro-3-indolyl-glucronide,縮寫為x-gluc)分解,產生肉眼可見的深蘭色化合物,藉此用來觀察轉基因植物中外源基因的表達情況,鑑定轉基因植株。

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