1樓：茅山0九叔
可能的原因：1，引物二聚體，可以通過熔解曲線來排除（染料法）；2，實驗室氣溶膠汙染或其它試劑汙染
qpcr螢光染料降解會讓陰性對照出現擴增嗎
2樓：匿名使用者
實時定量pcr是通過產物發出螢光,根據螢光強度來定量的.激發螢光的方式有螢光染料法和探針法.螢光探針比螢光染料更具特異性,可檢測特定序列的擴增產物的量.
螢光染料可以檢測pcr中獲得的全部雙鏈dna,但不能區分不同的雙鏈dna.
可以說螢光pcr包括探針法和染料法
不建議這麼做,pcr產物的話大部分的都會降解的,我有一次把pcr產物放在-20度裡四天都有降解的情況.建議跑膠**純化後儲存.
陽性對照，陰性對照等等什麼意思定量pcr的定量原
3樓：索萊寶生物科技
陽性對照就是肯定能檢測到的一組對照,一般就是你要檢測的目的基因的純mrn**段,用來驗證你的引物沒問題,體系沒問題之類的,這樣如果你的檢測組沒出結果就排除引物什麼的原因
陰性對照就是肯定不會檢測到的一組對照,一般就是不加模板,如果還能檢測出東西,就是mix或者水有汙染了
定量pcr是根據螢光強度進行定量的,簡而言之就是每擴增出一條鏈螢光強度就增加一些,然後再根據標準品測量做出濃度和ct值的關係做出曲線,將檢測的目的基因的ct值代入曲線中得到含量,
為排除pcr假陰性應該做什麼樣的對照實驗設計
設定嚴格的陽性和陰性實驗。陽性實驗是檢測pcr反應程式有無問題,陰性實驗是防止反應體系有汙染。生物實驗設計中為什麼要設立對照,陰性對照和陽性對照的作用分別是什麼?5 陰性對照的目的是排除假陽性,陰性對照就是乙個確定肯定已知是陰性的東西,如果結果出來這個樣本顯示陽性了,說明你的實驗有問題。陽性對照的目...
時陰性對照和陽性對照如何設定，分別有什麼意義
我舉個例子 假設我想評價某個新藥a對動物的降壓作用，那麼我就以市面上降壓作用肯定的某種藥物b做對照，看這個新藥a的降壓作用於b對照是否有效。b是陽性對照 同時，我以澱粉 無降壓作用 給予相同動物，那麼澱粉組是陰性對照。空白對照組 不加任何物質，反應顯色為試劑本身。陰性對照組 加入陰性血清 物質 反應...
生物實驗設計中為什麼要設立對照，陰性對照和陽性對照的作用分別
陰性對照的目的是排除假陽性，陰性對照就是乙個確定肯定已知是陰性的東西，如果結果出來這個樣本顯示陽性了，說明你的實驗有問題。陽性對照的目的是排除假陰性，陽性對照就是乙個確定肯定已知是陽性的東西，如果結果出來這個樣本測不出陽性反應，說明你的實驗有問題。空白有的時候可以當作是一種陰性對照。空白的特別意義在...