細胞實驗pcr和wb一指標什麼意思

2021-03-04 06:28:34 字數 1313 閱讀 6711

1樓:帥帥哥

胞水平進行wb和rt-pcr所需多少細胞,一般用多大的板子培...

:whole blood 全血(即未經任何方式分部分離的血液)

western blot,「western免疫印跡法」.是將蛋白質轉移到膜上,然後利用抗體進行檢測.對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測.

rt-pcr:

reversi transcriptase polymerase chain reaction逆轉錄pcr(逆轉錄聚合酶鏈反應)

起始模板是rna的pcr反應,需要乙個起始的逆轉錄酶以生成dna模板,某些熱穩定性聚合酶具有適當的逆轉錄酶活性.較常用的是先作逆轉錄後,將逆轉錄酶滅活或純化逆轉錄產物,再作常規pcr反應.

ihc:

inner hair cell 內毛細胞(規則地分布於基底膜之上、靠近耳蝸中心的一列毛細胞)

immunohistochemistry 免疫組織化學,利用抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑 (螢光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究.

請問實驗室的常用技術pcr,qpcr,rtpcr,western blot 分別是為了什麼目的進行的實驗?

2樓:匿名使用者

pcr 常用就是擴基因,提完rna後反轉啊,那你擴來基因用做什麼就需要你來看了。

菌落pcr,也是擴,放大數目,好驗證。

qpcr是螢光染料,做定量,一般是看表達,就是基因的表達情況,基因層面

rtpcr是半定量,相對上面的定量來說沒有完全量化,相當於是質化,也能看出問題

western 是做蛋白的

做實時pcr需要多少細胞

3樓:匿名使用者

如果你想做螢光定量pcr的根據實驗思路來說應該需要一下試劑和儀器

1.模板提取(一般為rna):trizol、氯仿、異丙醇、無水乙醇、depc處理水

2.模板濃度測定:分光光度計或nanodrop

3.逆轉錄:逆轉錄試劑盒(或者一步法試劑盒),這一步可以用普通pcr做,也可以用水域做。

4.螢光定量pcr試劑:通常有用sybr green mix做的,但是這裡建議你用evagreen做,靈敏度和平行性都要好於sybr green,並且如果你那是abi或者stratagene的pcr如果用sybr green還需要加一步rox很麻煩。

5.其他:除了以上的那些還需要離心管、pcr管或板(axygen反應比較好)、移液槍等,暫時就想到這麼多。

螢光定量pcr和實時螢光定量pcr還有反轉錄pcr都是什麼呀?有什麼區別,分別是什麼作用啊?謝謝啊

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