請教用培養的細胞做western

2021-03-04 06:28:34 字數 828 閱讀 8339

1樓:匿名使用者

做western blot需要多少細胞並不是乙個固定的值這主要取決於蛋白的表達量,沒有乙個絕對的量如果做細胞總蛋白的話,至少10的4次方細胞每微公升蛋白裂解液。一般可以每泳道取10的5次方細胞每微公升蛋白裂解液(即10微公升上樣)

根據這個數量級,結合western blot結果進行調整即可確認做western blot需要多少細胞

有用細胞培養液的上清做western的嗎

2樓:匿名使用者

沒有影響,最後讀值時的吸收值和你細胞培養液顏色又不是乙個步驟

細胞水煮裂解做western好嗎

3樓:我痛得多漂亮

蛋白提取時使用蛋白裂解液將細胞裂解,然後離心分為上清液和下層沉澱,如果你說的是這個上清液的話,那麼這個上清液是細胞中的可溶性蛋白,一般包括細胞質的蛋白和細胞核的可溶性蛋白,下層沉澱主要是細胞碎片以及不可溶的蛋白以及染色質之類的。

由於第一次做western blot ,想請教乙個問題,在做wb之前要對培養細胞中的蛋白質進行提取,也就是用裂解

4樓:白羊阿拉阿拉

蛋白提取時使用蛋白裂解液將細胞裂解,然後離心分為上清液和下層沉澱,如果你說的是這個上清液的話,那麼這個上清液是細胞中的可溶性蛋白,一般包括細胞質的蛋白和細胞核的可溶性蛋白,下層沉澱主要是細胞碎片以及不可溶的蛋白以及染色質之類的東西。

5樓:匿名使用者

上清液檢測的分泌蛋白 用的是elisa檢測 細胞裂解液檢測的是胞內蛋白含量。。。。

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