1樓:匡雅霜
這個一般是用來檢測引物質量的。
出現的情況大致為以下三種:
溶解峰值過小,說明擴增為引物二聚體,引物需要重新設計。
出現多個峰,說明有非特異性擴增,引物設計時最好blast一下。
沒有峰,那就是體系有問題,根本沒有進行擴增。
dna的溶解曲線有哪些特點
2樓:網友
是屬於爆發式的,所以a不對,解鏈的曲線基本相同,只是溫度不同,曲線沒有出現下降趨勢,所以正確答案應當是cd。一定要給加分哦!
3樓:網友
溶解曲線沒有明顯的峰說明沒有擴增產物,這裡面問題很多,比如溫度條件、引物條件等等,最好還是能夠找公司幫你設計引物,比如takara等公司,可以幫你設計引物。
4樓:閃妞畢鯤
均一性越高的dna,熔解越發生在乙個很窄的溫度範圍。
tm值和g-c含量有關,該含量越高,tm值越高。
dna二聚體的檢測值高出參考值25倍是什麼原因?
5樓:學一
1、d二聚體主要反映纖維蛋白溶解功能。
2、增高或陽性見於繼發性纖維蛋白溶解功能亢進,如高凝狀態、彌散性血管內凝血、腎臟疾病、器官移植排斥反應、溶栓**等。
3、只要機體血管內有活化的血栓形成及纖維溶解活動,d-二聚體就會公升高。心肌梗死、腦梗死、肺栓塞、靜脈血栓形成、手術、腫瘤、瀰漫性血管內凝血、感染及組織壞死等均可導致d-二聚體公升高。特別對老年人及住院患者,因患菌血症等病易引起凝血異常而導致d-二聚體公升高。
4、檢測結果的影響因素很多,各醫院結果不一樣不奇怪。高几倍都是非正常狀態,高25倍和高6倍都提示病理狀態(意義差不多),不能用來判定疾病嚴重程度。診斷不能光憑乙個檢測結果作出,還要結合症狀、體徵才行。
sybr green pcr溶解曲線有何意義
6樓:壞蛋老公他媳婦
作用類似於電泳,但是相對於電泳更靈敏,更清晰一些。
通過溶解曲線可。
以瞭解目的產物tm值,是否出現雜峰。一般溶解曲線的結果+電泳的結果和在一起相對比較準確。當然最後片段也可以測序最終確定目的產物。
主要的是:根據溶解曲線可以確定以下幾點:
a.擴增產物是否單一,即是否含有引物二聚體等其它非目的性產物。如果在90度左右的時候溶解曲線陡然下降,說明產物較純。
b.可以確定產物的tm值,一般在90度以上。
針對溶解曲線還有一條相應的曲線,看起來更方便一些。
dna溶解曲線表示擴增產物的特異性。
曲線橫座標是溫度,每個溫度點乙個。一般從60到98度縱座標是螢光強度的變化值(不是強度本身)。一開始加熱的時候,雖然螢光強度比較強,但是由於雙鏈沒有解離,所以螢光強度保持不變。
當加熱接近於pcr產物tm時,雙鏈開始解離,螢光強度變小,機器會比較前後2個溫度點的螢光強度,然後把2者的差值標在圖上。tm到達時,有一般雙鏈解離,這時的螢光強度變化最大(峰值)。再加熱,雙鏈全部解離,所以螢光強度的變化又變小了。
pcr產物大小不一,但是只要有相同或者相近的tm,峰值就有可能在乙個位置上。如果實際測得的峰值和理論計算的吻合,問題不大。如果有差別,說明有非特異性產物,不要再用sybr green方法。
怎麼通過q-pcr的擴增曲線和溶解曲線來分析結果,如何通過曲線來判斷結果的好與壞?
7樓:網友
擴增曲線要是s形的,融解曲線要單峰。滿足這些條件結果才可靠。
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