sds page跑了n次。marker條帶清晰,但是樣品沒有條帶。這是怎麼回事啊

2022-05-09 16:40:04 字數 1362 閱讀 7642

1樓:匿名使用者

首先,我建議你到丁香園或者說中國生命科學論壇發帖求助,能更快得到答案。

其次,你的問題說的不太清楚。譬如說你測得的蛋白濃度是多少呢?你有跟bsa標準曲線比對一下麼?

會不會是蛋白濃度太低需要濃縮呢?也有可能說你的分離膠和濃縮膠的濃度不適合你的蛋白。另外你跑的是什麼蛋白呢?

是比較純的蛋白還是全蛋白呢?如果說全蛋白的話沒有條帶,又有可能是你樣品處理的問題了。有可能的話發張圖上來幫你看看。

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能否說下你的蛋白樣品是如何處理的?是用什麼辦法提取的蛋白?

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看了樓下說的,我覺得你說的確實有問題,按說濃縮膠裡是不會有蛋白條帶的,我染色也從來都是把濃縮膠去掉的。應該是染色分離膠啊。看了你提取蛋白的步驟,我覺得也沒有什麼問題吧,你樣品是怎麼處理之後點樣的?

加1/4體積的5倍loading buffer麼?

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實在是看不出來問題所在。。。。有空把你的圖發到我郵箱 我想看看你的圖。

[email protected]

2樓:皇家大腸桿菌

濃縮膠裡當然沒有條帶了 ,條帶在分離膠裡。

可以嘗試下銀染色,靈敏度遠高於考馬斯亮藍染色

3樓:***

可能蛋白太濃了,一煮都沉澱了。

4樓:浙大阿公尺巴

樣品裡面壓根就沒有蛋白質唄

sds-page電泳時蛋白樣品沒有跑出條帶,急求原因

5樓:匿名使用者

可能有幾個原因:

一:上樣緩衝液,用分子轉殖上的配方做一次試試看(你所用的緩衝液是不是很久了?)

二:如果你染色,脫色都沒有問題,page膠是不會說謊的三:不知道你是在哪種波長下所測得有數值?

280nm是共軛雙鍵的吸收波長,很多物質都會有吸收,如果做親和層析時咪唑也有吸收,rna在280下也有吸收,可能你測得的是rna?

那麼你的蛋白質marker有沒有顯示條帶?

6樓:匿名使用者

看一下iptg的誘導濃度和時間

sds-page跑不出條帶是什麼原因啊!急求解決!

7樓:匿名使用者

沒大聽說過,染色以後結合的染料很難去除掉的。

我知道的是做western可以復性。蛋白轉導膜上,顯色(螢光、ecl)後再用tris溶液處理,再上一抗、二抗。

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