1樓：匿名使用者
dh5a e.coli dh5a在使用puc系列質粒載體轉化時，可與載體編碼的β－半乳糖苷酶氨基端實現α－互補。可用於藍白斑篩選鑑別重組菌株。jm109菌株
該菌株在使用puc系列質粒載體進行dna轉化或用m13 phage載體進行轉染時，由於載體dna產生的lacza多肽和jm09編碼的laczδm15進行α－互補，從而顯示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鑑別重組體菌株。
轉化實驗中除了用大腸桿菌的感受態細胞還可以用哪種菌的感受態細胞?
2樓：阿魯巴星人
要看你做的是什麼了。
大腸桿菌感受態根據用處的不同，也有很多種類，比如比較常見的top10、dh5α，質粒儲存較為穩定的jm109、stbl3，表達所用的bl21等等。
除此之外，植物基因轉化常用土壤農桿菌。
還有，你要在乳酸菌中表達蛋白或基因操作，就要用乳酸菌的感受態，你要在傷寒桿菌裡操作，就要做傷寒桿菌的感受態……所以，看實驗目的的。
感受態細胞製好後轉化不成功
3樓：匿名使用者
藍白篩選的原理：質粒如puc18上帶有β-半乳糖苷酶基因（lacz）的調控序列和頭146個氨基酸（n端），而大腸桿菌的lac-突變型dh5α可編碼β-半乳糖苷酶的c端，單獨表達這兩個片段均無β-半乳糖苷酶活性，同時表達兩個片段可融和（α互補）形成具有酶活性的β-半乳糖苷酶，在生色底物x-gal存在時形成藍色菌落。外源dna插入多轉殖位點，插入失活了lacz基因，破壞了α互補，因此帶重組質粒的菌落呈白色。
iptg是誘導物，誘導β-半乳糖苷酶表達
jm109應該也是lac-突變型的。
首先你用的質粒是否有amp抗性，沒有的話是不會長的，此外你還得做陰性和陽性對照，便於分析是感受態細胞的原因 還是轉化的問題等等
陰性對照是在含有氨苄，iptg，x-gal的lb平板上塗不加其它試劑的感受態大腸桿菌，沒有菌落生長，表明抗生素沒有問題，jm109中本身不帶有氨苄抗性。
陽性對照是在一不加氨苄,iptg,x-gal的lb平板上塗不加其它試劑的感受態大腸桿菌，菌長成一片，表明感受態大腸桿菌活性強。也可以加帶有amp抗性和lacz的質粒的大腸桿菌。
stbl3和DH5a感受態細胞的區別
首先，這兩種菌的基因型不一樣，這就導致了這兩種菌有不同的用途 dh5a是用於轉殖的，構建質粒，建庫，保藏質粒，等等，用的是它。bl21是專門用來表達蛋白的，如果用於儲存質粒，質粒會很不穩定。轉化實驗中除了用大腸桿菌的感受態細胞還可以用哪種菌的感受態細胞?要看你做的是什麼了。大腸桿菌感受態根據用處的不...
把DNA加入感受態細胞時產生泡沫有什麼影響
沒有什麼影響,放心做下去吧 就是不要吹打,輕輕攪一下就好了 因為感受態比較脆弱，吹打會殺死它們。由於鈣等離子附著在細胞膜上，形成液晶狀態，所以細胞膜會變得很脆弱，在轉化復甦之前，都要輕輕地操作 影響感受態細胞製備的因素有哪些 1 細菌的生長狀態 實驗中應密切注視細菌的生長狀態和密度，盡量使用對數生長...
製備感受態細胞時,應特別注意哪些環節
1 整個實驗過程均需置於冰上進行。2 選用對數生長期細胞，od600在0.4 0.5間。3 所有操作必須做到嚴格無菌，防止雜菌和雜dna的汙染。4 動作不應太劇烈，減少細胞的機械損傷。保證感受態細胞的活性，所有操作盡量在冰上，暴露在空氣中的時間盡量短。1 整個實驗過程均需置於冰上進行。2 選用對數生...