1樓：中國農業出版社
常規超低溫儲存：常規超低溫儲存通過調控預培養、冷凍保護劑處理時間、降溫速度和轉移溫度等關鍵環節，創造合適的脫水程度，實現超低溫儲存。
a.預培養和低溫處理：莖尖、愈傷組織、懸浮細胞、花粉、胚等器官或組織，均可作為超低溫貯存的材料。
在貯存前往往應對外植體進行預培養和低溫處理，以提高組織細胞的抗寒力。預培養一般需712d，培養基中加入能提高抗寒力的物質如山梨糖醇、脫落酸或增加糖濃度等。
低溫處理的做法一般是將外植體放在23攝氏度低溫下鍛鍊數天，處理後可明顯提高材料的抗凍力。有的甚至將植物材料在放入液氮，經過-20攝氏度或-70攝氏度的低溫預凍，仍可取得較好效果。b.
冷凍保護劑處理：超低溫處理前，還必須進行冷凍保護劑處理。其方法是：
先將保護劑預冷至0攝氏度，等體積與培養基混合，靜置3060min。這是因為dmso等保護劑有毒，所以必須在0攝氏度下處理，而且處理時間不宜過長，一般不超過1h。c.
降溫冷凍：材料以冷凍保護劑處理3060min後，應立即降溫冷凍，最後達到液氮低溫儲存。從0-196攝氏度的降溫過程。
d.化凍方法：化凍是再培養能否成功的關鍵。
公升溫給細胞造成的傷害並不亞於降溫帶來的傷害。公升溫損傷主要是降溫過程中形成的小冰晶重新增長的結果，同時化凍過慢，從-1960攝氏度的公升溫過程中，細胞內玻璃化水可能會發生次生結冰，從而破壞細胞結構，導致死亡。
植物的超低溫儲存有哪些作用？
2樓：中國農業出版社
超低溫（ultra-low：temperature）通常指低於-80攝氏度的低溫。
超低溫儲存一般是-196攝氏度（液氮）的超低溫下使儲存的活細胞的物質代謝和生長活動幾乎完全停止。這種方法不僅能夠保持生物材料的遺傳穩定性，而且也不會喪失其形態發生的潛能，有利於儲存和搶救物種，盡可能避免組織、細胞繼代培養及自然界中積累性突變等的發生，正成為長期穩定地儲存植物種質資源及珍貴實驗材料的乙個重要方法。近半個世紀以來，超低溫儲存技術發展很快，尤其在醫學和畜牧業中，利用超低溫冷凍技術成功儲存了動物和人的各種細胞和器官。
相對於動物細胞而言，植物細胞體積大、液泡化程度高，對冷凍極敏感，因此植物細胞超低溫儲存技術難度大。
關於植物材料超低溫儲存的首次報道是將胡蘿蔔懸浮培養細胞儲存在液氮中，解凍後觀察其細胞生長（nag和treet，1973）。迄今為止，用超低溫儲存成功的植物已超過100種。所研究過的植物材料有種子、芽及莖尖分生組織、原生質體。
超低溫儲存植物技術，包括材料選擇、預處理、冷凍及儲存、融化、後處理、活力評價、再生等，有的已較為成熟，並在許多植物種質中得到應用。超低溫儲存早期大多採用凍結化儲存技術，主要有快速冷凍和慢速冷凍兩種方法，現在新發展的有玻璃化法、乾燥冷凍法、包埋脫水法等新方法。
植物的超低溫儲存主要有哪些裝置？
3樓：中國農業出版社
用於超低溫保bai存的主要儀器裝置有：du用於細胞和組織zhi
培養dao的全套裝置、普通冰內箱、-70攝氏度及-20攝氏度的低溫容冰箱、程式控溫儀、封蓋嚴密的玻璃或塑料試管用於盛裝材料、液氮罐、分光光度計及光學顯微鏡、用於活細胞螢光檢測的紫外螢光顯微鏡。
圖2-1：植物離體材料超低溫儲存基本程式
植物超低溫貯存方法
4樓：巧克力默哀
小塊的放到離心管裡 大的不知道……不過一般小塊的凍得徹底 而且每次取樣也方便
放到液氮裡幾秒就可以了 時間長了也沒有害處
從液氮取出來不會立即解凍的 放冰裡帶到超低溫冰箱放進去就行
5樓：匿名使用者
記得是用有孔的塑膠袋包裝，直接放入也可。泡多久要看組織的大小和形狀，久泡無大礙但快了就不行了。取出後表面的液氮會不斷揮發吸熱保持低溫，故能維持一段時間而不解凍。
超低溫儲存植物的材料有哪些型別？
6樓：中國農業出版社
芽及莖來尖分生組織：芽的超低自溫儲存是無性繁殖植物種質儲存的簡便途徑。分生組織作為超低溫儲存材料更具有一些獨特的優勢，如再生完整植株相對容易、遺傳上更穩定、具有更快的營養繁殖方式、可產生無病植株、較細胞培養物更經受突然的冷凍等。
至今已有17個屬50餘種植物進行過莖尖分生組織超低溫儲存。
植物的超低溫儲存玻璃化為哪幾個種類？
7樓：中國農業出版社
在人工超低溫儲存中，玻璃化分為部分玻璃化和完全玻璃化。部分玻璃化一內般是指細胞內玻璃化，容早期的快凍法和二步法等常規超低溫儲存都是屬於此種型別；完全玻璃化是指受高濃度保護劑作用後的細胞連同保護劑本身在快速降溫中都進入玻璃化。
目前的玻璃化法凍存就是指完全玻璃化法凍存。對單個細胞來說，常規超低溫儲存中的胞外冰晶幾乎是不具傷害性的，但對整個器官或組織而言，所謂的胞外冰晶仍然是在細胞的間隙中，它會造成組織機械性的損傷。然而，玻璃化法凍存採取完全玻璃化的形式，在器官和組織水平儲存，對保護細胞與細胞之間的聯絡方面有較好效果，在凍存大塊的組織和器官時，這個優點變得更加明顯。
超低溫儲存的植物種質有哪些優點？
8樓：中國農業出版社
超低溫儲存植物種質，其目的是要長期保持植物具有高的活力、存活率以及遺傳性完整性，能通過繁殖將其遺傳特性傳遞下去。因此，對凍後細胞活力、存活率以及遺傳穩定性的檢測顯得非常重要。
植物的乾燥冷凍法儲存是怎樣做的？
9樓：中國農業出版社
乾燥冷凍法超低溫儲存：乾燥冷凍法也是快速冷凍法的儲存方法，一般是將植物材料經無菌、真空、矽膠或高濃度蔗糖等進行乾燥預處理，適度脫水，通過控制脫水速度和脫水程度以增強植物的抗凍性，然後液氮儲存。
最適脫水程度，因不同物種和不同組織可能有所不同，一般而論，乾燥冷凍法將植物材料的含水量由72%77%下降到27%40%後再浸入液氮中，這樣可使植物材料免遭凍死。
此法應用時也不需要昂貴的儀器裝置，操作簡便，是一種切實可行的超低溫儲存方法。
超低溫儲存的原理是什麼？
10樓：中國農業出版社
超低溫儲存時，降溫冷凍和化凍過程最易引起植物材料的傷害。
在降溫冷凍過程中，植物組織或細胞遭受凍害主要有兩個方面的原因，即細胞內部結冰和細胞內溶質的濃縮。由於細胞質最初是高滲透壓的，故而一般先使細胞外結冰，使得細胞膜內外的滲透壓梯度發生反轉，即發生細胞失水並逐漸變為脫水狀態，導致細胞的溶質也相應地發生濃縮。當細胞收縮超過臨界值時，會造成細胞的損傷。
一般說來，慢速降溫可使細胞內的水不斷流到細胞外結冰，而快速降溫時，細胞內的水來不及流到細胞外而造成胞內結冰。
因此，在降溫冷凍過程中必須創造乙個適宜的條件，使植物材料發生保護性脫水。冬季的植物材料，由於經過抗寒鍛鍊已經發生了保護性脫水及其他提高抗寒力的變化，所以採用冬季植物材料超低溫儲存容易獲得成功。採用一些「冷凍保護劑」或稱「防凍劑」可明顯地增強生物組織的抗冷和耐冷能力，目前實踐中往往採用如二四基亞碸、聚乙二醇（peg）、甘油及多種醣類等多種防凍劑配合使用以提高效果。
在化凍時要防止細胞內次生結冰，因此，多數情況下採用快速化凍方法，即在3440攝氏度溫水中化凍。
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