中藥藥理研究的具體方法,中藥藥理的研究現狀

2021-03-04 05:44:47 字數 4714 閱讀 4142

1樓:頑駄無

1 血清藥理學方法學研究

在中藥藥理學研究中,有相當一部分藥理活性實驗和作用機理是在體外進行的,而利用中藥粗提物直接進行體外實驗,其結果的真實性和可靠性都受到很大影響。中藥血清藥理學研究方法是指給動物經口用藥後一定的時間採血,取含藥血清進行體外實驗的一種研究方法,該方法由日本學者田代真一提出,95年前後國內即陸續開展。國家自然科學**委員會曾於2023年資助重點專案:

中藥複方體外實驗的方法學研究,在含藥血清藥理作用強度與體內給藥的量效關係研究、給藥方案研究、反應體系中含藥物血清加入量的確定、採血時間的確定及時效關係研究、含藥血清低溫儲存和血清滅活對效應的影響等方面做了大量卓有成效的工作。在以含頭風飲(川芎、天麻為主)藥物血清抗血小板釋放5-ht和阻滯內皮細胞鈣通 道作用為指標的實驗中證實:在一定範圍內,動物給藥量與吸收入血的藥物量及含藥血清的體外藥理效應呈正相關〔1〕;含藥血清的藥物濃度除與給藥劑量有關外,還與給藥方案 (如一日內給藥次數及給藥天數等)直接相關〔2〕;體外實驗體系中含藥血清加入量 的多少對藥理效應產生明顯的影響,因而對最佳反應體系的探索具有重要意義〔3〕 ;在採用血清藥理學方法進行實驗前,進行時效關係研究,找出給藥後最佳採血時間是十分 必要的〔4〕;含藥血清低溫儲存和血清滅活可能對藥理效應產生明顯影響,應以使 用新鮮血清或儲存時間較短的血清

為宜〔 5〕。鑑於目前多數中藥或複方有效成分尚不明確,成為制約中藥現代研究的瓶頸,近年 進行了中藥血清藥化學與血清藥理學協同研究的嘗試,以揭示產生藥效的物質基礎。提出在 建立血清化學成分指紋圖譜並測定相應含藥血清藥理效應強度後,進行藥物效應成分分析, 如果含藥血清的藥理效應強度與其血清指紋圖譜中某成分指紋峰大小相一致,則說明該成分 與所觀察藥理作用密切相關〔6〕。

中藥血清藥理學針對中藥及其複方複雜多樣的化 學成分的特點,結合化學、微生物學、分子生物學等多學科的先進技術手段,將有可能成為 中藥藥理學研究的一種新的方法體系。

2 單味藥藥理研究

常用單味中藥藥理研究是中藥藥理研究的重要內容。近年仍以對整體動物 藥理效應觀察及對器官、組織、細胞的影響等為主,現代生物技術如分子生物學研究方法 也受到廣泛關注和應用。研究的藥味相對集中,以補益藥、活血化瘀藥居多,不少常用中藥 的新藥理作用機理被揭示。

研究發現黃芪對自然衰老大鼠腦皮質、海馬、紋狀體3個腦區降低的m膽鹼受體和m1亞型受體密度有顯著的上調作用,並可調節老年大鼠血漿環核苷酸含量〔7〕;衰老大鼠心肌 β受體密度及t3、t4、皮質醇含量均降低,黃芪、人參、枸杞子可 公升高之〔8,9〕;對肝硬化大鼠存在的下丘腦血管加壓素系統異常有改善作用 〔10〕;可以明顯提高腎病症候群大鼠血漿白蛋白水平,改善腎小球濾過率和尿鈉排洩 〔11〕;對環磷醯胺所致免疫功能抑制小鼠細胞毒活性有顯著增強作用,並可能

通過調控巨噬細胞c1q的分泌功能來增強免疫和抗腫瘤作用〔12,13〕;還發現 黃芪煎劑及含黃芪小鼠血清均對小鼠脾淋巴細胞增殖、混合淋巴細胞培養反應及il-2的產生有促進作用〔14〕。冬蟲夏草水提液能降低正常心肌細胞內ca2+ 的濃度,減輕缺氧再給氧時細胞內ca2+超載現象,並明顯減輕缺氧再給氧時細胞 內脂質過氧化〔15,16〕。紅參在預防高血壓性視網膜動 脈硬化起重要作用,能使內皮細胞膜的光整性、細胞器的結構及內皮細胞分泌各種血管舒縮 物質保持正常,抑制平滑肌細胞的異常增生,還有擴張血管、減少外周阻力及調節血壓的作 用〔17〕。

生地黃可明顯抑制皮質酮致「陰虛」模型小鼠巨噬細胞ia抗原 的高水平表達,降低其提呈抗原能力,從而表現出一定的免疫抑制作用〔18〕。丹參注射液可明顯降低缺血再灌注引起的大鼠腦水腫,減少腦皮層及海馬組織丙二醛含量,提高過氧化氫酶、超氧化物歧化酶活性和還原型穀胱甘肽、三磷酸腺苷的含量〔19〕。

3 有效部位、有效單體藥理研究

隨著中藥化學成分提取、分離技術的進步,中藥藥理學與中藥化學學科結合更為密切, 中藥 有效部位、有效單體的藥理研究日益增多。近年研究涉及的有效部位和有效單體有數十種, 研究較多、較深入的有人參皂甙、雷公藤多甙、三七皂甙、淫羊藿總黃酮、川芎嗪、天花粉 蛋白、牛膝多醣、地黃多醣等。有效部位、有效單體藥理作用的深入研究,有助於揭示中藥 **疾病的機理。

研究發現,人參皂甙對輻射引起的細胞膜損傷有防護作用〔20〕 ;人參二醇皂甙對心肌缺血再灌注犬心臟功能具有保護作用〔21〕;人參根總皂甙 具有明顯抗dna損傷及抗突變效應〔22〕;人參皂甙rb1對應激性性行為低下有保護 作用,其機制可能與抑制應激動物血漿皮質酮公升高和提高睪酮水平有關〔23〕。雷 公藤多甙具有抗炎和免疫抑制作用,能顯著降低人工晶體表面、虹膜和睫狀體的炎症反應 〔24,25〕;對哮喘豚鼠肺組織的磷脂酶a2有明顯抑制作用 〔26〕。三七總皂甙顯著提高心肌細胞內肌漿網膜鈣幫浦活性,減少心肌細胞ca2 +〔27〕,對犬心肌缺血再灌注損傷有保護作用〔28〕。

天花粉蛋白能 明顯抑制小鼠黑色素瘤細胞s期dna合成,通過抑制瘤細胞**增殖以及誘導瘤細胞凋亡而 抗腫瘤〔29〕。

4 複方藥理研究

複方是中醫用藥的主要形式,以中醫藥理論為指導,運用現代科學手段,對古方和現代經驗方進行多指標的系統藥理研究,可以在更深的層次揭示方劑的**原理,有效地指導臨床用藥和中藥新產品研創。近年來,中藥複方在藥效學、藥代動力學和分子藥理研究等方面取得了較好的進展。

近年古方的藥理研究有數十首,其中桂枝湯、六味地黃湯、四君子湯、四物湯、大承氣湯、 補中益氣湯、當歸補血湯等研究較多。在古方研究中較多地**了方劑的作用機制,給方劑 的傳統功效描述賦予現代藥理學內容。如桂枝湯可能通過影響興奮胃腸運動的胃泌素、胃動素、p物質以及抑制胃腸運動的生長抑素、 血管活性腸肽等在下丘腦和胃腸道中的含量來調節胃腸運動〔30~33〕;桂枝湯 對與呼吸道感染有關的10株病毒致細胞病變均有不同程度的抑制作用,其含 藥血清能抑制單純皰疹病毒等4株病毒對hep-2細胞的增殖〔34〕。

當歸補血湯 含藥血清隨給藥劑量增加可使造血祖細胞集落數明顯增多〔35〕。將六味地黃湯 方視為乙個整體,以活性評價為導向,從六味地黃湯中定向追蹤分離 ,獲得了具有調節免疫功能的活性部位,該部位對th及tc的功能有調節 作用〔36〕。這些研究都在一定程度上說明了方劑的作用原理。

經驗方的藥理研究 開展得更為廣泛,其研究內容多結合新藥研究的有關要求,著重於藥效及安全性評價,不少 方劑已經或即將開發為新藥。

配伍是中醫用藥的特點和優勢所在,用藥理研究方法觀察方劑配伍與藥理效應變化之間的關係,**方劑的配伍規律,仍然是複方藥理研究的重要內容。近年雖然還是以方劑藥味加減 、正交設計等方法為主,但在應用中也有明顯提高,採用一些新方法來更好地分析方劑的配伍問題〔37〕。關於複方配伍規律的基礎研究99年納入國家自然科學**重點研究 專案,強調運用高新技術手段**方劑的物質基礎,綜合分析配伍-化學成分變化-藥理效 應三者之間的聯絡,闡明配伍內涵,成為新的探索方向。

生脈散複方化學動態變化與藥效關 系研究表明,各藥配伍後藥效的變化可能與產生新物質有關〔38〕。以方劑的物質 基礎研究為核心,注重方劑配伍理論與現代藥理互動作用理論結合,物質基礎分析與藥理效 應觀察相結合,從組成方劑的單味藥、方劑的化學部分以及化學成分三個層次**方劑的配 伍與物質基礎的變化的關係,在整體動物、器官組織、細胞亞細胞及分子生物學四個水平上 **方劑的配伍、物質基礎的變化與藥理效應間的聯絡,已成為複方配伍研究的基本思路 〔39〕。

5 藥代動力學研究

藥代動力學研究機體對藥物的處理規律,對於深入了解藥物的作用機理,指導臨床合理用藥 ,制定適宜的用藥方案等均有重要意義。中藥藥代動力學尤其是方劑的藥代動力學研究尚 無很好的方法和手段,目前主要採用體內藥物濃度法、藥物累積法(動物急性死亡率法)、藥理效應法、微生物指標法等,但因受到諸多因素的制約,尚待進一步完善。近年進行了黃 芩 甙、葛根素、苦參鹼、芸香甙、綠原酸、鉤藤鹼、馬錢子鹼、千金藤素等成分在動物體內的 藥代動力學研究,但單一有效成分的藥代引數顯然還難以反映含有該成分的單味中藥或複方 的藥代動力學過程。

2023年黃熙等提出複方效應成分動力學假說,將中藥複方看作是乙個整 體的藥物,研究方劑效應成分在體內的命運。認為所謂「複方效應成分」可以是母方中的原 形單體,也可以是母方中不含有的新成分,既可能是乙個,也可能是多個化學成分(組成); 「效應」既可以是活性效應,也可以是毒性效應〔40〕。有人提出綜合運用中藥有 效成分藥動學-藥效學同步分析統一模型、血清藥理學方法及高效毛細管電泳、二維及三維 高效液相色譜法、液質聯用或質質聯用技術等,進行中藥及複方的藥代動力學研究〔4 1〕。

中藥藥理的研究現狀

2樓:捉摸不透丶仵堢

步入21世紀,中藥藥理研究進入了乙個嶄新的時期,各地大力加強規範化藥理實驗室的建設,尤其是國家科技部在中藥現代化專案中啟動了規範化中藥藥理實驗室建設專項,在規範化建設的基礎上建立新的方法、新的模型,保證資料客觀準確,提高中藥研究的整體水平。現代化的中藥藥理研究表現為多學科的配合,從數學、生物物理、生物化學、分子生物學、免疫學、現代心理學等學科角度研究中藥作用機理,用現代科技術語闡明中藥方藥的傳統功效。許多創新性關鍵技術被陸續應用於中藥藥理研究中,許多實驗室可以在整體、器官、細胞和分子水平上以及系統調控等方面,進行中藥藥理研究。

藥理試驗

資料庫知識(knowledge discovery in database,簡稱kdd)技術在中藥化學成分與藥效方面的研究日益增多,其中潛在的知識為複方藥效物質的化學結構資訊與機制的研究開拓了新的視野。

中藥藥理研究處於極活躍狀態,僅2023年發表的中藥藥理研究報道就達1100餘篇;研究重點主要集中在單味中藥方面,注重應用中藥有效成分(或有效部位)去**中藥藥效的作用機理,有關中藥藥性等基礎研究以及中藥臨床藥理學的研究(包括都分臨床藥學)較以往有明顯的增多,更加體現出中藥藥理學的科學性及實用價值。相對而言對中藥複方製劑的藥理研究報道較少,研究較膚淺。從國家自然科學**近三年受理的情況來看,在中醫學與中藥學學科中,中藥藥理研究申請數明顯偏多(約佔中藥學的60%左右),主要以抗炎免疫、抗腫瘤、心血管及消化系統疾病為主,研究層次較深,不少已深入到基因表達調控水平。

中藥藥理研究在單味中藥特別是方劑(傳統古方及經驗方)的配伍規律研究、中藥藥性理論與功效研究方面已開展了大量的工作。

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