如何利用螢光顯微鏡測定組織細胞ros
1樓：匿名使用者
流式檢測ros的特異性比較差。一般來說，針對過氧化氫和超氧化物有螢光探針。加到細胞培養液後，細胞攝齲遇到ros，可以發出螢光，上機檢測可以比較各組之間螢光強度的變化從而代表ros水平的不同。
你這個圖橫座標代表的是相對螢光強度，縱座標代表的是細胞計數。圖的含義就是在每個螢光強度有多少細胞。估計你用了氧化敏感的螢光指標，ros反應後螢光增加。
所以你應該先用對照組設乙個閾值，看實驗組的螢光強度有沒有高於或者低於該閾值。
轉染 後用螢光顯微鏡觀察細胞是否有螢光出現 在
2樓：進擊的小站長
我最近常做這個實驗，gfp也在n端，與目的蛋白融合表達，我對cos-1轉染該融合片段的感想總結如下：
1）轉染細胞狀態一定要好，這是成敗的關鍵。我選擇的是早晨消化cos，分瓶密度高，下午即在60%滿時，就轉染1-2ugdna，6hr換液用低血清（1%fbs）dmem維持。
2）gfp-目的蛋白由於cmv啟動子問題，表達效率太高，對細胞的正常狀態不利，尤其是細胞狀態不好的細胞。所以常有細胞漂浮起來、凋亡的現象，看螢光時，可以將細胞上清洗滌後觀察。
3）根據不同蛋白的性質決定的，有的蛋白具有nes、nls或跨膜區、訊號肽等功能性序列，可能將gfp帶到胞外。
4）細胞的性質決定gfp位置：如cos細胞，常形成液泡，佔據大量胞漿，gfp有時會沿著這種胞液分佈，要選擇高倍鏡觀察。
5）觀察要仔細，選擇可見光和高倍數螢光看。
祝您成功！
螢光顯微鏡觀察細胞染色，為什麼要先用乙醇固定
3樓：匿名使用者
染色是提高標本顯微觀察效果的關鍵措施：：由於活體的微生物個體的顏色在顯微鏡下差別很小，同時所觀察樣本中所含的微生物種類繁多，個體微小，形態千差萬別。每一種的組織結構。
內含物質複雜多變，相互間交織貫穿在一起。如果不加染色顯然是很難在顯微鏡的視野中把它們相互區別出來。正是因為這樣，由於標本內部的微生物種類、形態、組織結構、物質大分子的成分染色劑的化學反應。
著色）各有不同。通過染色，它們之間就會形成各自不同的顏色梯度，從而產生不同的視覺對比度。
這樣便有利於在顯微鏡下把它們的個體形態、著色差別、內含物、組織結構區分出來。所以大多數的標本都需要染色才能更好地在顯微鏡進行下觀察。染色是製作永久標本的必須步驟和措施：
在製作永久儲存標本時，必須對標本進行固定和染色，通過固定和染色才能把標本的外部形態和內部結構層次永久固定下來，使之得以長久儲存不分解變質。不是所有的觀察標本都需要染色：染色的標本雖然能夠增加標本的色度。
和色差，但在固定、染色過程中由於化學作用的緣故，也會使一些內部物質的形態和分子結構發生變性而失真，從而影響觀察的真實性。再者，一些活體觀察是不需要或不能使用染色劑的。
螢光顯微鏡在細胞生物學研究中有什麼應用
4樓：回家種紅薯去不
螢光顯微鏡是以紫外線為光源，照射被檢物體發出螢光，在顯微鏡下觀察形狀及所在位置，影象清晰，色彩逼真。
螢光顯微鏡可以觀察細胞內天然物質經紫外線照射後發螢光的物質（如葉綠體中的葉綠素能發出血紅色螢光）；也可觀察誘發螢光物質（如用丫啶橙染色後，細胞中rna發紅色螢光，dna發綠色螢光），根據發光部位，可以定位研究某些物質在細胞內的變化情況。
如何將倒置螢光顯微鏡下看到的細胞數轉化為實際的細胞數
5樓：趴趴貓
我們公司有專業計數軟體，能自動識別細胞個數。
考慮的話 可以私信我。
觀察細胞時為什麼使用螢光顯微鏡
6樓：愛我家菜菜
螢光顯微鏡(fluorescence microscope) ：螢光顯微鏡是以紫外線為光源， 用以照射被檢物體， 使之發出螢光， 然後在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。螢光顯微鏡用於研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分佈及定位等。
細胞中有些物質，如葉綠素等，受紫外線照射後可發螢光；另有一些物質本身雖不能發螢光，但如果用螢光染料或螢光抗體染色後，經紫外線照射亦可發螢光，螢光顯微鏡就是對這類物質進行定性和定量研究的工具之一。
如何在 螢光顯微鏡下觀察切片的gfp細胞
7樓：最愛秋天的傳說
首先，你需要確定你想觀察細胞的什麼東西。你只想把細胞染亮的話，用calciem am，染核的話用dapi或者hoescht33342，染死細胞核的話用pi，染線粒體，內質網，endosome，actin等都有自己的染料。
然後，你根據不同的染料的說明配製溶液，養細胞，有些染料很快，比如dapi染細胞核就是分分鐘的事情，有的染料要慢一些，那麼就要多養一會兒。
如果你用螢光顯微鏡看，你首先要確定你的螢光顯微鏡可以用來看細胞，一般看哺乳動物細胞的顯微鏡是倒置的，如果你的顯微鏡是正置的，操作會比較麻煩。然後你要確定你的顯微鏡的激發光可以激發你要用的染料，比如，有的顯微鏡沒有紫外光，那麼就不能用dapi染細胞核。
如果你這些搞清楚了，你能正確操作顯微鏡，那麼你就可以上鏡去看了，注意，在螢光顯微鏡下，染料可能被淬滅掉，所以有些染料，你看得時候要快一點。
8樓：匡扶正義的蝸牛
在透明玻璃上滴上一滴鹼水就可以清晰的觀察了。
螢光顯微鏡與普通光學顯微鏡結構相同的有
目鏡。目鏡也是顯微鏡的主要組成部分，它的主要作用是將由物鏡放大所得的實像再次放大，從而在明視距離處形成乙個清晰的虛像 因此它的質量將最後影響到物像的質量。在顯微照相時，在毛玻璃處形成的是實像。某些目鏡 如補償目鏡 除了有放大作用外，還能將物鏡造像過程中產生的殘餘像差予以校正。目鏡的構造比物鏡簡單得多...
螢光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區別
螢光顯微鏡和普通顯微鏡主要區別是照明光源不同。螢光顯微鏡使用的是紫外光照明，而普通顯微鏡使用的是可見光作為照明光源。螢光顯微鏡 螢光顯微鏡是以紫外線為光源，用以照射被檢物體，使之發出螢光，然後在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。螢光顯微鏡用於研究細胞內物質的吸收 運輸 化學物質的分布及定位等。細胞...
螢光顯微鏡ICT是什麼意思
1 分子內電荷轉移 ict intramolecular charge transfer 2 螢光顯微成像是研究活體生物的重要工具，而最通常的細胞成像方法則是使用單光子激發螢光團的單光子顯微成像。3 雙光子螢光顯微成像是最新的研究，它兼具諸如近紅外激發 暗場成像 避免 定靶激發 高橫向解析度與縱向 ...