如何正確的選擇熒光定量PCR儀,解析熒光定量PCR儀選擇有哪些要點及誤區

2021-08-11 09:31:43 字數 1902 閱讀 7500

1樓:匿名使用者

定量的儀器建議買進口的,技術相對成熟一些,而且產地也要在國外。有很多進口品牌是在國內設廠的需要注意,一定要國外原裝進口的。然後就是**,有的**高,有的**低,相同**下就看效能了。

就像買手機一樣,高階的手機很多功能根本用不上,低端的又根本不能用,選擇最合適自己的。進口品牌主要由life、伯樂、roche、takara等,國內的西安天隆、安捷倫等。

2樓:北京索萊寶科技****

定量pcr儀主要由兩部分組成,一個是pcr系統,一個是熒光檢測系統。選擇定量pcr儀的關鍵——由於定量pcr必需藉助樣本和標準品之間的對比來實現定量的,對於定量pcr系統來說,重要的引數除了傳統pcr的溫控精確性、升降溫速度等等,更重要的還在於樣品孔之間的均一性,以避免微小的差別被指數級放大。至於熒光檢測系統,多色多通道檢測是當今的主流趨勢——儀器的激發通道越多,儀器適用的熒光素種類越多,儀器適用範圍就越寬;多通道指可同時檢測一個樣品中的多種熒光,儀器就可以同時檢測單管內多模版或者內標 樣品,通道越多,儀器適用範圍越寬、效能就更強大。

熒光檢測系統主要包括激發光源和檢測器。激發光源有滷鎢燈光源、氬離子鐳射器、發光二極體led光源,前者可配多色濾光鏡實現不同激發波長,而單色發光二極體led**低、能耗少、壽命長,不過因為是單色,需要不同的led才能更好地實現不同激發波長。監測系統有超低溫ccd成像系統和pmt光電倍增管,前者可以一次對多點成像,後者靈敏度高但一次只能掃描一個樣品,需要通過逐個掃描實現多樣品檢測,對於大量樣品來說需要較長的時間。

定量pcr儀需要考慮的另外一個因素是軟體設計,這一點目前較新型號的儀器都有不錯的配套軟體可以滿足常規使用

解析熒光定量pcr儀選擇有哪些要點及誤區

3樓:侯飛翼

biosaferpcr儀引數參考:1、樣品臺:標準模組:

96×0.2ml+77×0.5ml混合模組;可另選384well模組a;96*0.

2ml模組b;54*0.5ml模組c2、溫度範圍:0℃—99℃;3、升溫速率:

≥4.0℃/s; 4、降溫速率:≥3.

5℃/s; 5、溫度均勻性:≤±0.2℃; 6、溫度精確性:

≤±0.2℃; 7、梯度溫度範圍:30—99℃; 8、梯度溫度寬度:

30℃; 9、熱蓋溫度:30—115℃可調 10、程式儲存量:200; 11、最大迴圈數:

99; 12、圖形介面:5.7寸大螢幕中文lcd,顯示擴增過程相關引數和圖表; 13、通訊介面:

usb 2.0及rs 232; 14、帶時間遞增/遞減功能,適合長鏈基因(450nm以上)的擴增; 15、帶溫度遞增/遞減功能,適合科研需求。

熒光定量pcr儀,請問我是選相對定量還是絕對定量做

4樓:南京金益柏生物科技****

可以的。你把內參和目的基因都設成unknown,然後輸出資料,得到內參和目的基因的ct值。按照公式2-△△ct計算fold change就可以了。

就是有點麻煩,得自己算。我也是用abi7300絕對定量軟體做的相對。

實時熒光定量pcr儀器怎麼用的

5樓:匿名使用者

用已知濃度的dna樣本(通常是質粒)梯度稀釋成一系列的樣本。做實驗的時候,這些標準品和待測樣本加在同樣一塊96孔盤的不同孔內。一起做pcr。

標準品的熒光強度和已知的濃度作圖,可以得到一條標準曲線。而待測樣本的熒光強度測出以後,就可以在標準曲線上算出樣本濃度了。

6樓:匿名使用者

實時熒光定量pcr儀器,風途ft-pcr既可在實驗室內操作,又可用於野外科學實驗,配合相應試劑,對取自待檢測樣本的分析物或其他分析物中的目標核酸進行快速、準確的定性檢測。

實時熒光定量pcr儀有哪些種類,各有什麼特點

螢光定量pcr的相對定量怎麼用,螢光定量PCR的相對定量怎麼用

管家基因是用來定量的。用來計算相對表達量。管家基因在相同量樣品中的表達量我們認為是一致的。然後根據這個量來計算你的基因在不同樣品中的表達量。所以每乙個都需要單獨的樣品。基因組干擾需要你在提取rna以後用dnase處理樣品。如果不放心,可以拿處理過的rna做膜版,跑一次,如果有帶就是有汙染,如果沒有可...

實時熒光定量PCR儀國產有哪些,價格及相關技術引數

東林的觸屏pcr儀不錯,新品上市,8英寸高解析度觸控式螢幕 具有高度靈活性,多種模組容量選擇,滿足多種實驗需求。到鼎國生物瞭解諮詢吧。biosaferpcr儀引數參考 1 樣品臺 標準模組 96 0.2ml 77 0.5ml混合模組 可另選384well模組a 96 0.2ml模組b 54 0.5m...

螢光定量PCR引物設計的問題

ls說得很對 你可以手動改動幾個鹼基,降低引物裡面的dimer,主要是3 端沒有dimer就好。錯配問題,可以用taqman探針來檢測,但是很貴,實在設計不出來再用。可以多設計幾對,然後做個引物測試,挑選出幾對好的,再做qrt。你是直接用primer5設計的引物嗎?有時候時會遇到你說的問題,你可以在...