檢測目的基因是不是只有酶切鑑定 PCR後電泳 測序這三種方法

2021-04-17 22:07:41 字數 917 閱讀 1039

1樓:匿名使用者

還有其他的方法,比如分子雜交,根據你檢測的是dna還是rna可選用southern或northern雜交。

還有轉基因內,瞬時表達,螢光

容定量pcr等等。

主要是看你檢測基因的目的及所要達到的要求是什麼。如果是看構建的載體是否成功,可用酶切,或pcr方法;如果要檢測突變體,則用pcr+測序;如果想檢測目的基因表達量則用螢光定量pcr;如果想看載體是否匯入目標生物體及其表達情況,則可用轉基因或瞬時表達或分子雜交。

希望對你有幫助!!

2樓:匿名使用者

以上方法均正確,為最常用的方法。其中以測序最好,因為可以檢測到基因是否發生了突變。

3樓:狂飛陽

還有比如檢測是否有基因的表達產物

質粒連線目的片段,菌液pcr後電泳有目的條帶,為什麼送菌液測序結果是空載體呢 ?

4樓:exo不偷井蓋

1、你bai

的實驗目的是什麼? 2、如果du是克zhi隆,連線t載體後不用酶dao

切,直接轉化菌專落pcr檢測有目屬

的條帶的話送樣測序即可。 3、如果是做表達載體構建,pcr產物和質粒dna酶切後與沒有酶切的在同一塊膠上電泳,如果兩個酶切位點很近,幾乎看不到被切下來的小片段條帶(太小,早就跑出去了)。你要是怕酶切不完全就多稍微加點酶,切的時間長一點。

4、關於酶切產物有幾條帶視酶切效果而定,酶切完全則兩條,一大一小(小的可能看不到,原因見3、)酶切不完全則三條帶,一大一小及未切開的pcr產物;質粒的話可能還多一條環狀分子和線狀分子的區別。

5樓:落葉來也

確定有目的條帶麼?

如果確定連上了,可能就是挑菌的時候不是單菌落,重新挑,或者原點再取點,塗佈或者劃線。

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