怎麼降低組織冰凍切片免疫螢光的背景

2021-03-04 06:14:32 字數 1188 閱讀 3485

1樓:桐薇

控制好抗原孵育的溫度,尤其注意血清封閉時的濃度。

組織切片免疫螢光背景很深但目的沒有染上怎麼辦

2樓:

二者應該都具體要看自身實驗條件哪操作更便及抗體性質看實驗要求冰凍片要求較

高(低溫環境液氮冰凍切片機oct包埋劑等等)石蠟片製作比較簡單試劑較便宜另外看購買抗體適用於哪種片

免疫組化般都使用石蠟切片免疫螢光染色都冰凍切片比較容易操作需要修復;石蠟切片操作起步驟比較相說比較複雜點且需要抗原修復程再者購買抗體適合哪種切片應該說明書面寫清楚祝運

小鼠腎臟組織冰凍切片做免疫螢光怎麼固定組織

3樓:南京金益柏生物科技****

比較標準一點的可能是切片前後都需要固定,前固定時間較長,後固定時間較短。但有時為了簡便,可能有時只做前固定或者後固定。

請教:肺組織石蠟切片的免疫螢光結果失敗原因

4樓:南京金益柏生物科技****

你這個可能原因有:

1 抗體濃度太大引起非特異著色----解決辦法:降低抗體濃度,可以先在組化上摸一下濃度(主要是一抗)。

2 **時間太長-----解決辦法:縮短**時間,我們一般ms範圍,dapi,200倍下我們是60ms左右(螢光顯微鏡,其他儀器時間不論)

3 蠟引起的背景----解決辦法:徹底脫蠟,每缸時間都要延長。

5樓:匿名使用者

幾點建議,希望有用:

1. dapi濃度降低,或時間縮短,或拍攝時注意調整,太強了。

2. 不知道有沒有摸索抗體的濃度和到底好不好用。取組織(包括陽性對照和肺組織)根據抗體說明書,摸合適濃度,另加上陰性對照(不加一抗)。

不怕麻煩的話還是建議做組化,先不做螢光,當然組化的呈色掌握不好的話,直接螢光也可以,也省得後期再調整濃度。

石蠟切片的自發螢光也是比較重的。但是感覺你的主要問題還在於抗體濃度和孵育時間沒有摸索好,包括dapi的孵育時間,一般3min就足夠了!

免疫螢光技術為什麼要使用冰凍切片免疫螢光技術中使

6樓:南京金益柏生物科技****

只有新鮮切片才能螢光染色,這樣子做出來的資料才比較準確哈,所以選擇用冰凍是最大程度與上選用材料

冰凍切片免疫螢光封片後可放多長時間

二者應該都復是可以的,具體要制看自身的實驗條件哪個操作bai更du方便以及抗體的性質。看你的實zhi驗要求 dao,冰凍片要求較高 低溫環境,液氮,冰凍切片機,oct包埋劑等等 石蠟片的製作就比較簡單,試劑也較便宜。另外看你購買的抗體適用於哪種 免疫螢光技術為什麼要使用冰凍切片 只有新鮮切片才能螢光...

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