怎麼看蛋白質電泳分析結果圖,以及它的原理是什麼

2021-03-04 05:16:59 字數 1201 閱讀 4620

1樓:雯王

雙向電泳就是等電聚焦電泳和sds-page的組合。

1.先進行等電聚焦電泳(按照蛋白等電點pi分離):在膠中加入雙性電解質溶液,加上電場後建立穩定ph梯度,蛋白質溶液加入後建立電場,蛋白以不同pi分離開來。

2.然後再進行sds-page(按照分子大小):將上一步的膠加上橫向電場,同一pi中聚集的蛋白,由於分子量不同而分開。

經染色(一般是銀染)得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。

二維電泳使用於蛋白組學研究,對大批量蛋白篩選鑑定中存在很大優勢,通過不同膠做對比,把不同處的膠割出來單獨鑑定。

我是初學者,跑出來的蛋白電泳圖,那些一排一排的條帶是什麼意思,還有一列一列的

2樓:匿名使用者

你的膠是考染的嗎?

首先你得先知道一點蛋白質的基本理論知識(不會不知道吧?難道你是學醫的?),或者說蛋白質(包括其他分子,如dna、rna等)電泳的原理(或者說是分離原理)。

只說蛋白質:蛋白質在正常情況下,一般帶有負電荷,因由不同的蛋白分子因為性質(空間結構以及基團性質)不同而帶電量不同,這樣結合蛋白質分子本身的不同質量,會在電場下(即電泳中)產生不同的移動速度,進而將不同的蛋白分離開。又為了消除蛋白質分子間性質的差別,創造乙個單一因素的電泳分離條件,所以在進行蛋白質電泳之前,都會對蛋白質進行變性處理(非變性膠等不在此列),使蛋白質肽鏈開啟:

sds是陰離子去汙劑,作為變性劑和助溶試劑,它能斷裂分子內和分子間的氫鍵,使分子去摺疊,破壞蛋白分子的

二、**結構。而強還原劑如巰基乙醇,二硫蘇糖醇能使半胱氨酸殘基間的二硫鍵斷裂。在樣品和凝膠中加入還原劑和sds後,分子被解聚成多肽鏈,解聚後的氨基酸側鏈和sds結合成蛋白- sds膠束,所帶的負電荷大大超過了蛋白原有的電荷量,這樣就消除了不同分子間的電荷差異和結構差異。

如此,蛋白質(準確的說應該是變形後的蛋白質或者是蛋白- sds膠束)便會在電場中根據不同的帶電量- 亦即分子量而分成不同的條帶。每一條帶代表著不同分子量大小的蛋白質組合(一組蛋白質)。

上面只說的是sds-page膠蛋白質電泳。當然,在電泳後,需要進行染色,你才能看到蛋白條帶(marker除外,因為它是帶有耦合染料的蛋白質分子或片段)。

3樓:匿名使用者

乙個條帶代表一種氨基酸。電泳的原理生化書上自己看

4樓:一直嚮往安靜

給個圖才能解釋。不給圖怎麼解釋啊

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