高效液相色譜分析法中如果組分保留時間太長,可採取什麼措施調節

2021-03-20 05:09:05 字數 3535 閱讀 8375

1樓:伊森弓長

可以適當提高流速,來縮短目標物被固定相吸附的保留時間。也可以改變一下流動相的比例或梯度洗脫的比例,通過調整流動相的極性來縮短目標物被固定相的吸附時間。

高效液相色譜法如果將流動相中甲醇的比例提高,對測樣品的保留時間有何影響

2樓:千葉雅之

一般來說反相色譜中提高甲醇或者乙腈等有機相比例之後,樣品的保留時間會縮短,出峰會提前。

高效液相色譜分析法中為什麼要採用梯度淋洗

3樓:匿名使用者

色譜法(chromatography)又稱色譜分析、色譜分析法、層析法,是一種分離和分析方法,在分析化學、有機化學、生物化學等領域有著非常廣泛的應用。色譜法利用不同物質在不同相態的選擇性分配,以流動相對固定相中的混合物進行洗脫,混合物中不同的物質會以不同的速度沿固定相移動,最終達到分離的效果。

1、色譜的起源

色譜法起源於20世紀初,2023年**植物學家公尺哈伊爾•茨維特用碳酸鈣填充豎立的玻璃管,以石油醚洗脫植物色素的提取液,經過一段時間洗脫之後,植物色素在碳酸鈣柱中實現分離,由一條色帶分散為數條平行的色帶。由於這一實驗將混合的植物色素分離為不同的色帶,因此茨維特將這種方法命名為chromatography,這個單詞最終被英語等拼音語言接受,成為色譜法的名稱。漢語中的色譜也是對這個單詞的意譯。

色譜法茨維特並非著名科學家,他對色譜的研究以俄語發表在**的學術雜誌之後不久,第一次世界大戰爆發,歐洲正常的學術交流被迫終止。這些因素使得色譜法問世後十餘年間不為學術界所知,直到2023年德國柏林威廉皇帝研究所的庫恩將茨維特的方法應用於葉紅素和葉黃素的研究,庫恩的研究獲得了廣泛的承認,也讓科學界接受了色譜法,此後的一段時間內,以氧化鋁為固定相的色譜法在有色物質的分離中取得了廣泛的應用,這就是今天的吸附色譜。

在柱長為18cm的高效液相色譜柱上分離組分a和b,其保留時間分別為16.40min和17.63min......

4樓:匿名使用者

1、n1=16(tr/w1)2

=16(16.40/1.10)2

約等於3556

n2=16(tr2/w2)2

=5.54(17.63/1.21)2

約等於3397

n=(n1+n2)/2=3476

2、理論塔板高度(h)每單位柱長的方差。h=。實際應用時往往用柱長l和理論塔板數計算:

h=l/n

=18/4770cm

3、分離度r=2(tr2-tr1)/(w1+w2)=2(17.63-16.40)/(1.11+1.21)=2* 1.23/ 2.32

=1.06

4、柱長計算

r1/r2=(l1/l2)的平方根。

式中:r1 為已知柱長為 l1時某物質對的分離度, l2為將同一物質對分離到需要達到分離度為r2 時所需要的柱長。

1.06/1.5=(18/l)的平方根。

(1.06/1.5)平方=18/l

l=18/(1.06/1.5)平方

l=36.04cm

高效液相色譜中的持留時間是什麼意思

5樓:j奇蹟

你說的應該是保留時間,意思是說每一種能被液相檢測的物質,在同樣的色譜條件下,它的出峰時間是一樣的,可以通過分析物的保留時間來對分析物進行定性分析。

液相 保留時間一致 如何解讀

6樓:千葉雅之

液相色譜圖其實就是乙個橫軸是保留時間,縱軸是電訊號的圖譜。

在同一條件下,保留時間是特徵標識,所以保留時間一致的就是同一種物質。

比如在這張色譜圖中,保留時間是4.0133min的是土黴素,9.7347min的是金黴素。

那麼我再次進樣,保留時間4.01min左右保留時間的物質都可以看做是土黴素;9.73min左右保留時間的就是金黴素。

而電訊號強弱相當於峰高。它可以讀取出乙個引數叫做峰面積。同乙個物質,峰面積大小和濃度成正比。

比如這張圖,已知土黴素保留時間為4.0133min,峰面積是1000,濃度是1.0mg/ml。

那麼我測定乙個未知濃度的樣品,出峰時間為4.0102min(這就算是一致了),峰面積為500

這個物質就是土黴素,根據峰面積和濃度成正比的規律計算,樣品濃度就應該是0.5mg/ml

高效液相色譜中的持留時間是什麼意思?

7樓:匿名使用者

保留時間:是樣品從進入色譜柱到流出色譜柱所需要的時間,不同的物質在不同的色譜柱上以不同的流動相洗脫會有不同的保留時間,因此保留時間是色譜分析法比較重要的引數之一。

保留時間由物質在色譜中的分配係數決定:

rt = t0(1 + kvs / vm)式中rt表示某物質的保留時間,t0是色譜系統的死時間,即流動相進入色譜柱到流出色譜柱的時間,這個時間由色譜柱的孔隙、流動相的流速等因素決定。k為分配係數,vs,vm表示固定相和流動相的體積。這個公式又叫做色譜過程方程,是色譜學最基本的公式之一。

8樓:匿名使用者

樓上的對。即保留時間,指樣品從進樣到出峰的時間。用來確定它的性質,每個樣品的出峰時間的不同的。

據個例子,比如你進 點丙酮,就2分多種就出峰了,進個奈就4分多種才出,假如你街上撿到乙個樣品,進里一針,出峰時間也是4分那時候。那你就知道你撿到乙個奈的樣品。

很簡單啊 。

不懂就加分和你細細說。

9樓:落城香

就是液體從進入色譜柱裡到出來的時間嘛

10樓:瀟湘竹姬

即保留時間,指樣品從進樣到出峰的時間。

色譜法中,組分的遷移速度與流動相的速度有關嗎?

11樓:千葉雅之

一般說的液相色譜柱多指的是反相色譜柱。反相色譜柱比如c18、c8、苯基柱等等。

這些柱子儲存在有機相中,比如甲醇、乙腈裡面比較好,所以封存的時候大多用甲醇或者乙腈。反相的流動相大多數都是緩衝鹽的溶液,而鹽溶液在純有機相中容易析晶,所以才會有乙個10%的甲醇水(或乙腈水)作為緩衝。

所以每次使用的時候,柱子裡面是甲醇,然後先用1.0ml/min的流速沖洗30min的10%甲醇水,然後上流動相平衡,大約30min基線跑平了就可以進樣了。

使用結束之後同樣沖洗30min的10%甲醇水,把流動相裡面的緩衝鹽沖洗掉,然後用甲醇沖洗30min封存。

這個30min是大約10倍的柱體積,針對的是比較常見的250mm*4.6mm內徑的柱子,如果你用的是短柱可以自己計算一下沖洗的時間。

如果你是正相,因為正相色譜的流動相裡沒有無機鹽,所以拿過來就可以直接沖洗流動相進行平衡了。使用結束之後直接用規定的正相溶液封存就可以了。

甲酸在液相分析時候的停留時間是多久

12樓:中二養成計畫

hplc的保留時間跟條件有很大關係(所以問別人也沒用),你要在同一條件下自己用標準物質去測保留時間

13樓:匿名使用者

甲酸不出峰的,保留時間極小。

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