多重種類特異性pcr需要注意什麼

2021-03-04 09:00:59 字數 1716 閱讀 5220

1樓:北京索萊寶科技****

做多重的時候需要你建立單重pcr後再進行多重pcr的條件優化,根據電泳條帶決定加減個因素的用量;用特異性引物擴增不出條帶是因為樣品dna中沒有特異性引物所對應的基因吧。

pcr擴增產物的特異性與哪些因素有關

2樓:匿名使用者

pcr產物的電泳檢測時間 一般為48h以內,有些最好於當日電泳檢測,大於48h後帶型不規則甚致消失. 假陰性,不出現擴增條帶 pcr反應的關鍵環節有1模板核酸的製備,2引物的質量與特異性,3酶的質量及, 4pcr迴圈條件.尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。

pcr非特異性擴增指的是你進行pcr所擴增出來的條帶不是所要的,引物與模板在非目的條帶處有錯配,導致延伸產物不是目的條帶。非特異性擴增在瓊脂糖電泳時可以看到在目的條帶外出現了其他條帶。

引起非特異性擴增的原因有很多,mg2+濃度過高、退火溫度太低、引物特異性不好等等原因

3樓:南京金益柏生物科技****

首先,引物特異性要好 再,注意操作,避免交叉汙染等

itraq 可以識別特異性蛋白嗎

4樓:芥末留學

itraq是體外標記,bai試驗週期相對來說較du短,silac是體內標zhi記,試驗dao

週期相對來說較長一點專。silac定量主要是屬一級質譜定量,itraq主要是二級質譜定量。兩者 的定量準確性及蛋白解析度方面差別不是很大,一般推薦有錢有時間選擇silac,趕時間就用itraq。

做這塊的話可以考慮找市場上專業的生物技術平台幫你做的,省時省力,推薦金開瑞生物工程。

pcr檢測大腸桿菌用什麼引物特異性最好

5樓:南京金益柏生物科技****

衡量copy值是detag的絕對值在適度的範圍較高bai。而此引物du在基因組其他位置沒有配率很zhi高的地方。這樣設計出來dao的引物p出來的目的片段特異性就會比較好,衡量水平是detag的絕對值越小越好就是指引物與該匹配的目標模板以很高程度匹配(一般是100%)

pcr出不來,引物特異性不高怎麼辦

6樓:北京索萊寶科技****

建議:1. 不表達是很可能的,查閱文獻。可以換一種細胞的cdna,也可以重新提一次***的。

2. 引物設計的的時候可以不加酶切位點,與基因的完全匹配,可以適當增加長度(30-40bp)。

3. pcr時可設計乙個正對照,保證pcr的過程沒問題。

4.適當降低一點退火溫度,使用兩輪pcr試試

梅毒特異性抗體結果331.000是什麼程度

7樓:健康小衛士

這是抗bai體的乙個檢測數值,說du

明有梅毒抗體,但zhi是不能

dao說明患病程度,患病程度需

內要抗體和滴度相結

容合,如果非要乙個患病程度的話,抗原這麼高的情況下大概是二期或是三期,而且患病時間應該不會太短

梅毒是可以治好的,**效果需要根據你選擇的方法來確定,在北京首先**時間不會太長,同時效果也有保障

螢光定量pcr方法的特異性和準確度怎麼計算

8樓:南京金益柏生物科技****

特異性主要看檢測的目的樣品是否是專一的,準確度主要看測量資料之間的偏差

PCR出不來,引物特異性不高怎麼辦

建議 1.不表達是很可能的,查閱文獻。可以換一種細胞的cdna,也可以重新提一次 的。2.引物設計的的時候可以不加酶切位點,與基因的完全匹配,可以適當增加長度 30 40bp 3.pcr時可設計乙個正對照,保證pcr的過程沒問題。4.適當降低一點退火溫度,使用兩輪pcr試試 pcr後電泳是特異性條帶...

果蠅的心臟組織心臟特異性表達pcr可以用全身表達相對比嗎

樓主建議查詢文獻哈,這個是有文獻,建議樓主採納哈 組織特異性的qrt pcr怎麼計算表達量 qrt pcr 是一種應用廣泛的研究基因表達模式的方法,尤其是在樣品量少 螢光定量pcr方法的特異性和準確度怎麼計算 特異性主要看檢測的目的樣品是否是專一的,準確度主要看測量資料之間的偏差 pcr後電泳是特異...

載體蛋白一定要和特異性受體結合嗎

醣蛋白也叫糖被,存在於細胞膜的外表,由細胞膜上的蛋白質與多醣結合形成。受體蛋白專 存在於屬細胞膜上,化學傳遞物質和引起嗅覺 味覺的化學物質以及多種藥物等,通過與細胞膜上的各相應受體蛋白進行特異性結合後,才會起作用。載體蛋白都是跨膜蛋白,是生物膜中運載離子或分子穿膜的蛋白質。採納一下 載體蛋白和受體蛋...