紫外可見分光光度法的使用方法,紫外可見分光光度計的具體使用方法

2021-03-04 08:54:59 字數 5291 閱讀 4327

1樓:匿名使用者

《中華人民共和國藥典》2023年版 第一部 附錄va (p附錄28): (1) 波長 由於環境因素對機械部分的影響,儀器的波長經常會略有變動,因此除應定期對所用的儀器進行全面校正檢定外,還應於測定前校正測定波長。常用汞燈中的較強譜線237.

83nm、253.65nm、275.28nm、296.

73nm、313.16nm、334.15nm、365.

02nm、404.66nm、435.83nm、546.

07nm與576.96nm,或用儀器中氘燈的486.02nm與656.

10nm譜線進行校正,鈥玻璃在279.4nm、287.5nm、333.

7nm、360.9nm、418.5nm、460.

0nm、484.5nm、536.2nm與637.

5nm波長處有尖銳吸收峰,也可作波長校正用,但因**不同或隨著時間的推移會有微小的差別,使用時應注意。

(2)吸光度的準確度可用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定。取在120℃乾燥至恒重的基準重鉻酸鉀約60mg,精密稱定 ,用0.005mol/l硫酸溶液溶解並稀釋至1000ml,在規定的波長處測定並計算其吸收係數,並與規定的吸收係數比較,應符合表中的規定。

波長/nm235(最小)257(最大)313(最小)350(最大)吸收係數

的規定值 124.5 144.0 48.62 106.6 吸收係數

的許可範圍 123.0~126.0 142.

8~146.2 47.0~50.

3 105.5~108.5 (3) 雜散光的檢查可按下頁表的試劑和濃度,配製成水溶液,置1cm石英吸收池中,在規定的波長處測定透光率,應符合表中的規定。

試劑濃度%(g/ml)測定用波長(nm)透光率 %碘化鈉 1.00 220 <0.8 亞硝酸鈉5.

00340<0.8 測定時,除另有規定外,應以配製供試品溶液的同批溶劑為空白對照,採用1cm的石英吸收池,在規定的吸收峰波長±2nm以內測試幾個點的吸收度,或由儀器在規定波長附近自動掃瞄測定,以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確,除另有規定外,吸收峰波長應在該品種項下規定的波長±2nm以內,並以吸光度最大的波長作為測定波長。一般供試品溶液的吸收度讀數,以在0.

3~0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應小於供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度會偏低;狹縫寬度的選擇,應以減小狹縫寬度時供試品的吸收度不再增大為準,由於吸收池和溶劑本身可能有空白吸收,因此測定供試品的吸光度後應減去空白讀數,或由儀器自動扣除空白讀數後再計算含量。

當溶液的ph值對測定結果有影響時,應將供試品溶液和對照品溶液的ph值調成一致。

(1) 鑑別和檢查 分別按各品種項下的方法進行。

(2) 含量測定 一般有以下幾種。 按各品種項下的方法,分別配製供試品溶液和對照品溶液,對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分規定量的100%±10%,所用溶劑也應完全一致,在規定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸光度後,按下式計算供試品中被測溶液的濃度∶

cx=(ax/ar)cr

式中 cx為供試品溶液的濃度;

ax為供試品溶液的吸光度;

cr為對照品溶液的濃度;

ar為對照品溶液的吸光度。 供試品溶液加入適量顯色劑後測定吸光度以測定其含量的方法為比色法。

用比色法測定時,應取數份梯度量的對照品溶液,用溶劑補充至同一體積,顯色後,以相應試劑為空白,在各品種規定的波長處測定各份溶液的吸光度,以吸光度為縱座標,濃度為橫座標繪製標準曲線,再根據供試品的吸光度在標準曲線上查得其相應的濃度,並求出其含量。

也可取對照品溶液與供試品溶液同時操作,顯色後,以相應的試劑為空白,在各品種規定的波長處測定對照品和供試品溶液的吸光度,按上述(1)法計算供試品溶液的濃度。

除另有規定外,比色法所用空白係指用同體積溶劑代替對照品或供試品溶液,然後依次加入等量的相應試劑,並用同樣方法處理制得。

紫外可見分光光度計的具體使用方法

2樓:墨滅故事

1、機器開關在機器的右側,按一下就會開啟,有個小的螢幕,可以按數字鍵來操作選項,測吸光值操作。

2、按數字鍵1,進入選項,有當前引數、吸光度等。

3、點選鍵盤上的goto鍵去設定,一般設定為600,輸入直接按數字鍵就可以。輸入之後按enter這個鍵,這個是確認鍵。

4、把樣品放到比色皿裡面,留乙個比色皿方蒸餾水,將蒸餾水的比色皿放到第乙個其餘的依次放入。

5、蓋上一起的蓋子,拉環的位置正處於測定第乙個比色皿的位置,這一步需要歸零,按鍵盤上的zreo鍵。

6、歸零之後,開始依次用力拖動把手,顯示屏上就會顯示出對應的吸光度,依次紀錄數值,就能完成測定吸光值的實驗。

3樓:阿儀網

的具體使用方法:

– 監測控溫條件下的酶反應

– 建立定量曲線並同步進行未知濃度樣品定量

– 進行程式公升溫實驗

– 定量分析核苷酸和蛋白質

實驗流程,化繁為簡

– 可以在一秒內同步完成 8 個通道樣品的全波長掃瞄

– 可同步執行四個獨立溫區的試驗,大大縮短分析時間

– 可對樣品進行 0-110 °c 準確快速的控溫試驗,無需水浴,沒有噪音及雜亂管線的困擾

– 提高公升溫速率,縮短公升溫時間,同時保證資料質量,更快分析更多樣品

實驗結果,準確穩定

– 可靠測量高吸收樣品,避免稀釋,減少誤差

– 無移動部件、無需校準,即使是小體積樣品也能確保每次分析獲得可重現、準確的結果

– 在完全相同的條件下同步測量標樣、樣品和對照品

– 取樣速率高達 250 點/秒,確保不遺漏重要的樣品資訊

多個樣品、多種溫度,同步執行

同時在四個不同溫區下測量樣品

cary 3500 多區控溫紫外-可見分光光度計無移動部件,且*多可配置四個獨立的溫控區域。每對比色皿可以保持在不同的溫度,允許您同步執行四個獨立的溫控實驗。

包含內建的軟體控制攪拌功能。通過高效能 cary 溫度探頭即時讀取緊鄰樣品測量位置的溫度,可準確可靠地控制樣品溫度。

一次資料採集,多種方式分析

氙燈每秒產生 250 個資料點,波長掃瞄速率高達 150000 nm/min,您不會因為反應速率比儀器資料採集速率快而錯過任何重要資料。固定池位置意味著沒有資料間隙,不同於傳統多池支架必須在池之間進行物理移動,而可能錯過關鍵資料。

使用強大的 cary 紫外工作站軟體可分析多元資料組,從而充分利用資料。

高達 110 °c 的無水浴溫控系統

整合式空氣冷卻的帕爾貼溫控系統,無需配置龐大的水浴系統,這意味著遠離雜亂管路困擾,無漏水風險,靜音執行,無需維護。

無移動部件和永jiu光學準直的穩定設計,無需調節和校準。

快速準確地實現 0 °c 到 110 °c 的溫度測量。之前必須緩慢公升溫的實驗現在可以每分鐘 30 °c 的速率進行公升溫,並保證了溫度的準確度和重現性。

cary uv workstation 軟體為您提供快速、高質量及準確的資料

標樣校驗、樣品測試,同步完成

1 秒內完成標準曲線建立和樣品測量

將標樣放置在八池支架中,其他位置放入樣品。在相同條件下同步測量所有 8 個位置的樣品(其中乙個位置為參比樣品)。在通常只能採集乙個資料的時間內,快速得到完整標準曲線和樣品濃度資料。

cary 3500 uv-vis 配備異面 littrow 雙單色器及高能量的氙燈,可以測量吸光度高達 5 abs 的樣品。這意味著可更快獲得結果,減少稀釋,降低誤差。

小體積,大不同

寬度小於 1.5 mm 的高度聚焦光束可提供zui高準確度資料

agilent cary 3500 紫外-可見分光光度計極小而永jiu聚焦的光束可輕鬆透過小孔。固定式多池支架無需校準,每次可為多達 8 個微量比色皿提供可重複的測量,無需操作人員調節。

程式公升溫,巨大變革

在任意公升溫速率下均可得到可靠結果

準確快速的溫度控制

獨特的 cary 比色皿內溫度探頭具有輕質、大表面積和超快速反饋迴路等特點。探頭直接從樣品中讀取瞬時溫度,這是 cary 3500 uv-vis 能夠以極高準確度將樣品從 0 °c 公升溫到 110 °c 的關鍵。即使以每分鐘 30 °c 的速率公升溫,也能獲得這種準確度。

溫度準確度不受公升溫速率影響,因此即使公升溫速率超乎想象,您依然可以信賴溫度讀數。

這意味著更高質量的資料和更快的採集速率。

4樓:泉月

使用前儀器要調零、調百校準,參比溶液又稱空白溶液。測量時用作比較的、不含被測物質但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常,用參比溶液掃瞄的曲線應是一條平坦的直線。

有時,基體中雖不含被測物質,但含有別的物質,這時必須保證其不影響測試。經常碰到的是試劑空白中含有被測物質,此時必須經過純化將其除去。否則將影響測定結果。

在色譜分析中,有時基體中可能存在乙個以上的和被測組分相距較遠的色譜峰,計算機在資料處理中不會計入它們,不影響測定。

以所含鐵離子是多少為例:

參比溶液與測量溶液就相差鐵離子含量,在測量之前要用不含鐵離子的參比溶液掃瞄,調整儀器後(調100的過程),然後再測量含鐵離子溶液的比色皿,這樣測量溶液中的鐵離子會形成自己特定的峰值,次峰值與資料庫裡基準峰值對比就可以得出溶液所含量了。如果資料庫中沒有鐵離子的曲線,你還要自己先用不同鐵離子濃度的溶液做工作曲線,然後進行測量。

5樓:夏啟爾飛雙

你現在手上一共有兩種不同廠家的比色皿嗎,那只能是用單一廠家來進行比色測定,然後對照標準曲線,這樣只在乙個系統內產生誤差、很小,如果你把兩種不同廠家的比色皿混用是沒法準確得出真實吸光值的,我認為是這樣,雖然麻煩點但資料可靠~

【平の楽\(^o^)/小平平】

紫外可見分光光度法特點和適用範圍

6樓:清溪看世界

一、紫抄外可見分光光

度法的特點

1、與其它光譜分析方法相比,紫外可見分光光度法事物儀器裝置和操作都比較簡單,費用少,分析速度快。

2、紫外可見分光光度法的靈敏度高。

3、紫外可見分光光度法的選擇性好。

4、紫外可見分光光度法的精密度和準確度較高。

二、紫外可見分光光度法的適用範圍

紫外可見分光光度法可適用於定性定量分析、純度分析、結構分析。特別在定量分析和純度檢查方面,在許多領域更是必備的分析方法,例如食品等行業中的產品質量控制。

擴充套件資料

紫外可見分光光度法的注意點:

1、準備操作儀器前,需要先檢視一下指標儀器在斷電的情況下,表面指標是否指向零刻度。如若不是,理應先調零然後才能連線電源。

2、在使用的過程中,操作員應該盡量避免對鏡燈的觸碰,放大器使用過後,一定需要把檔位歸置到零。

3、在操作紫外可見分光光度計時,操作人員需要留意一下機器的乾燥劑。

4、紫外可見分光光度計在開機前將樣品室內的乾燥劑取出,儀器自檢過程中禁止開啟樣品室蓋。

可見分光光度計和紫外分光光度計的使用有什麼區別

可見分光光度計的波長適用範圍一般從350nm左右開始到1100nm左右,紫外可見分光光度計的波長適用範圍一般從190nm到1100nm.從這點區別上看就是波長的適用範圍不一樣,紫外可見分光光度計多了從190到350nm左右這段波長.正式由於這段紫外光的區別,就決定了他們的儀器結構部件有一些不同了,他...

紫外檢測儀跟紫外可見分光光度計的區別

你說的是紫外檢測器吧?每個藥品都有自己特定的波長處會有最大吸收,紫外檢測器搭配液相色譜分析儀共同測定藥品的含量或者其作他分析用的,準確度較高。紫外分光光度計比較常用的就是檢測紫外波長的最大最小吸收度,做鑑別用,還有就是在這個藥品特定的最大吸收波長處測定吸光度,然後分析其含量或者溶出度。結構什麼的就不...

原子吸收分光光度計的核心部分是,紫外可見分光光度計與原子吸收分光光度計的結構及各主要部件作用的異同點

原子吸收光譜儀又稱原子吸收分光光度計,根據物質基態原子蒸汽對特徵輻射吸收的作用來進行金屬元素分析。它能夠靈敏可靠地測定微量或痕量元素。原子吸收分光光度計由四大部分組成,即光源 單色銳線輻射源 試樣原子化器 單色儀和資料處理系統 包括光電轉換器及相應的檢測裝置 深圳市瑞盛科技 原子吸收分光光度計產品配...