1樓：星星
利用同一限制性內切酶種切取同一種粘性末端然後再用同一種連線酶講他們聯絡起來，再用質粒將其匯入受體菌的染色體中，
2樓：007浮雲漫天
還可以用soe-pcr法將兩基因連到一起，但你要考慮載體啟動子的問題，可能由於融合基因構象或啟動子能力的問題無法正確表達。你可以設計雙啟動子。
3樓：匿名使用者
就是dna酶切和連線實驗，具體什麼基因什麼內切酶要根據你的目的基因選定，大膽做，沒問題的
如何構建乙個基因的過表達載體
4樓：風翼殘念
當拿到乙個基因的dn**段後，就需要把它匯入乙個載體，一方面長期儲存。另一方面也需要以載體為媒介將基因匯入受體細胞中。基因表達載體的構建是基因工程的核心。
常用的載體有細菌質粒，噬菌體和動植物病毒。其中質粒載體最常用。所謂載就是乙個很長的環狀dna，攜帶一些基因，可以匯入細菌中自我複製，也可以從細菌中提取出來改造。
現在我們就需要把sun片段連到乙個載體，用vectornti開啟，研究一下用哪個酶處理，這個載體需要用**a1這個酶切開，然後用sun連上，替換切下來的ccdb，這裡要用到兩個酶，乙個**a1限制性內切酶切開，乙個dna連線酶把新片段連上，植物轉基因載體和這些酶都是非常常用的試劑。
載體構建好之後需要把它們匯入大腸桿菌中複製，這裡就要用到大腸桿菌的感受態了，十把構建好的載體和感受態混合，然後放到42度熱水處理個1分鐘，再冰上放個3分鐘。
這時需要一些培養細菌的培養基來培養菌們，大腸桿菌這種菌很好養活，唯一需要注意的是，滅菌過後的培養基要小心儲存。把在冰上處理過的大腸桿菌放到培養基中培養一天，為了防止沒有轉入載體的菌也混進來，我們在載體上加入了乙個抵抗抗生素的基因。
這樣我們在培養基中加入這種抗生素，在裡面就只有需要的大腸桿菌能生長了。最後得到了上億個攜帶著含有我們的sun基因的載體的大腸桿菌，這時就需要把質粒再提出來。
實驗室裡提質粒需要用專門的試劑盒，也可以簡化一下，先把菌液離心讓菌沉澱，然後再用水把菌打散，然後煮沸1分鐘再離心，取上清，上清中加乙醇讓dna析出，再離心讓dna沉澱，最後用水把dna溶解。這樣提出來的dna會有很多雜質以及細菌的基因組dna。
5樓：匿名使用者
用限制酶分別切割目的基因兩側及運載體，然後在dna連線酶的作用下就形成了基因表達載體。
6樓：紫耀星之軌跡
首先要用一定的限制酶切割質粒，使質粒出現乙個缺口，露出黏性末端。然後用同
一種限制酶切斷目的基因，使其產生相同的黏性末端（部分限制性內切酶可切割出平末端，擁有相同效果）。將切下的目的基因的片段插入質粒的切口處，首先鹼基互補配對結合，兩個黏性末端吻合在一起，鹼基之間形成氫鍵，再加入適量dna連線酶，催化兩條dna鏈之間形成磷酸二酯鍵，從而將相鄰的脫氧核糖核酸連線起來，形成乙個重組dna分子。如人的胰島素基因就是通過這種方法與大腸桿菌中的質粒dna分子結合，形成重組dna分子（也叫重組質粒）的。
將目的基因構建在表達載體上的方法有哪些
7樓：匿名使用者
有兩種常用的方法。第一種是直接將pcr擴增的基因片段酶切，然後連線到酶切過的表達載體上。第二種是先把pcr產物連到過度載體上，再從過度載體搶切下目的基因，最後再連線到酶切過的表達載體上。
如何將兩個電梯併聯,如何將兩個電梯併聯
很簡單嗎啊 用乙個併聯板連線就可以了 但是電梯系統也要改 這個要看你的控制器有沒有這個功能，若支援，這個就需要諮詢廠家了！我所接觸的控制器如瀋陽藍光，支援併聯，操作也簡單，只需接三條線，再引數裡設定併聯使能和併聯梯號。那要看兩台電梯的具體位置 加根並聯線加個程式就可以 現在的控制系統都是模組化設計，...
如何將兩個電腦螢幕相連，怎麼將兩台膝上型電腦螢幕連線起來
方法 步驟分步閱讀。點開之後找到投影，如果是要連在一起的話，選擇擴充套件，如果是第一次使用投影，點選下面的黃色部分字型連線到無線顯示器。然後找到另一台電腦的藍芽，把兩台膝上型電腦連線上，就完成了連線，再按上述步驟就ok了。把兩個電腦螢幕缺點的話 你可以乙個螢幕插在主機上面 另外乙個螢幕的話 就在他在...
如何將兩個的excel工作表合併在excel中，就是合併
將兩個excel合併在一個方法如下 先開啟sheet1，將內容複製黏貼到sheet1 新增一個頁面，將第二頁記憶體黏貼到sheet2，如圖所示，按 號可新增多個頁面 很多使用者都會有這樣的需求，以2003版本為例 在視窗選單中，選擇並排視窗 提前開啟那兩個要合併的excel工作表再使用此功能，否則容...